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產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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仙台病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Sendai Virus(SV)RTPCR |
YS-P014739 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適(shì)當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
仙台病毒PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模板與引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶基因片段也(yě)就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式(shì)增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反應液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為擴增模(mó)板。可直接用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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