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產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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馬胃葡萄(táo)球(qiú)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Staphylococcus equorumPCR |
YS-P014768 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超過正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存不當或試劑配製不(bù)準確(què)引起的試劑檢測效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與保守性。
馬胃葡萄球(qiú)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的溫度下進行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不一定要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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