產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
|
犬鏈球菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Streptococcus canisPCR |
YS-P014782 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為1年，這(zhè)是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一般(bān)要貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
犬(quǎn)鏈球(qiú)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與(yǔ)模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚(jù)合酶合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以指數方式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
