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PCR檢測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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馬鏈(liàn)球菌馬(mǎ)亞(yà)種(zhǒng)PCR檢測試劑盒(hé) |
Streptococcus equi subspecies equiPCR |
YS-P014784 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般為1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴增部分的試劑一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足，否則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本；對於(yú)可疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性。
馬(mǎ)鏈(liàn)球菌馬(mǎ)亞(yà)種PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應中模(mó)板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產物一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用同位素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
