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PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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極細密螺旋體PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Treponema pertenuePCR |
YS-P014848 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存不當或試劑配製(zhì)不準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能會(huì)導致出現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
極細(xì)密螺旋(xuán)體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈的延伸是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確度。再通過(guò)選擇特(tè)異性和保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
