產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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文(wén)氏(shì)密(mì)螺旋體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Treponema vincentiiPCR |
YS-P014850 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可能會(huì)導致出(chū)現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
文氏密(mì)螺旋(xuán)體PCR檢測試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大增加，被擴增的(dí)靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能保持很(hěn)高的正確度。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要用同位(wèi)素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨床標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
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