產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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河流(liú)弧菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Vibrio fluvialisPCR |
YS-P014909 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若復核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不當或試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能下降，可(kě)能(néng)會導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守性。
河流弧(hú)菌PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通(tōng)過選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高的靶基(jī)因區(qū)，其特異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加好後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
