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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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弧(hú)菌通用(yòng)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Vibrio spp.PCR |
YS-P014912 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可能會導致(zhì)出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
弧菌(jūn)通用PCR檢測試(shì)劑盒其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中模板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性高的靶基因區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞中檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地將反應液加好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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