產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
|
假(jiǎ)結(jié)核耶爾(ěr)森(sēn)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Yersinia pseudotuberculosisPCR |
YS-P014936 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判定為陽性，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣品交叉(chā)汙染會出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
假結(jié)核耶(yé)爾(ěr)森菌PCR檢測試劑盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引物的結合(復(fù)性)可以在較(jiào)高的(dí)溫度下進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要用同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
