產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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百(bǎi)日咳杆(gān)菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P014949 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準確引起的試劑檢測效能(néng)下降，可(kě)能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
百(bǎi)日咳杆(gān)菌PCR檢測試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板的正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異性和(hé)保守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是(shì)以指數(shù)方式增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術概論。
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