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產(chǎn)品中心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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產氣莢膜梭菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P014966 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議復核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引起的試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與保守性。
產氣莢膜梭(suō)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反應(yīng)液加好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析，不(bù)一定要用同位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
