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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 規格 | 貨號 |
|
腸(cháng)道(dào)病毒PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P014969 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判定為陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能(néng)下降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
腸(cháng)道病毒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保持很高(gāo)的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶基因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在細菌學中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
