產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
單增李斯(sī)特菌prfA基因熒光PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)(探針法)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
|
單增(zēng)李斯(sī)特菌(jūn)prfA基(jī)因熒光PCR檢測試劑盒(探針(zhēn)法) |
50T |
YS-P014998 |
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核(hé)一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
單增李斯(sī)特菌prfA基因(yīn)熒光PCR檢測其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原則(zé)的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板與引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結(jié)合的特異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再通過選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在(zài)細菌學中zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液加好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一定要用同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
- 上(shàng)一(yī)條：彈狀病毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
- 下一(yī)條：單增李(lǐ)斯(sī)特菌prfA基因(bp)常規PCR檢測試劑盒
