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產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
|
漢坦病毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015045 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保守性(xìng)。
漢坦(tǎn)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模板的正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫度下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大大增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性和保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度要求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
