產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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壞死梭杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015054 |
儲存(cún)條件:-20℃避光保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有效期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一(yī)般為1年,這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸擴增部分的試劑一般(bān)要貯存於-20℃下,產物檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性,有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35;
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿足(zú),否則(zé)該次實(shí)驗視為無效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本;對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議復核(hé)一(yī)次,若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期,則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性;
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果;
2. 試劑運輸,保存不當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效能下降(jiàng),可能會導致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。

②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性;
④靶基因的特異性與(yǔ)保守性。
壞死梭(suō)杆菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的特(tè)異(yì)性大(dà)大增加,被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一次性(xìng)地將反應(yīng)液加好(hǎo)後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng),一般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī),不一(yī)定要用同位素,無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè),體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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