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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號 |
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柯(kē)薩奇病毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015088 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年，這是(shì)指在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則判定為陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配製不準確(què)引起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
柯薩奇(qí)病毒PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合及(jí)引物鏈的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將反應液加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直接用臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
