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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
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綿(mián)羊(yáng)痘病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015136 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般為1年，這是指在(zài)適當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
綿羊痘病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段也就能保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度。再通過選擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其(qí)特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論。
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