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PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨號 |
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人(rén)博卡(qiǎ)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015204 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部分的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會(huì)導致出現假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的(dí)特異性與保守性。
人博(bó)卡病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高的溫度(dù)下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用同位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要分離病毒或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論。
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