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產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
彎(wān)曲杆(gān)菌(jūn)S rRNA基因熒光(guāng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)(探針法)
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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彎曲(qū)杆菌S rRNA基因熒(yíng)光PCR檢測試劑盒(hé)(探(tàn)針(zhēn)法(fǎ)) |
50T |
YS-P015266 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保守性。
彎(wān)曲杆菌S rRNA基因(yīn)熒光PCR檢測試劑盒(探(tàn)針法)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地將反(fǎn)應液加好後，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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