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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
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血清(qīng)型(xíng)耶(yé)爾(ěr)森氏(shì)菌ail基因常規PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015287 |
儲存(cún)條件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī):一年(nián)
貨(huò)期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián),這是指在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍融。

u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為陽性,有明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無效。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本;對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一(yī)次(cì),若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期,則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定為陰性;
3. 陰性(xìng):無指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染,試劑(jì)汙染,樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸(shū),保存不當或試劑配製不準確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng),可能會導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果。

②鹼(jiǎn)基配對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
血(xiě)清(qīng)型(xíng)耶(yé)爾(ěr)森氏(shì)菌(jūn)ail基因常規(guī)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng),使反應中模板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較高的(dí)溫度下進(jìn)行,結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大增加,被(bèi)擴增的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區,其特(tè)異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞;在病毒的(dí)檢測(cè)中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位);在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次性地(dì)將(jiāng)反應液加好後(hòu),即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng),一(yī)般在2~4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析,不一(yī)定(dìng)要用同位(wèi)素,無放(fàng)射性汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液,體腔液,洗嗽液,毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技(jì)術概(gài)論。
