產(chǎn)品中心
PCR檢測試劑(jì)盒
乙(yǐ)型肝(gān)炎病(bìng)毒拉米(mǐ)夫定(dìng)耐藥(yào)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
|
乙(yǐ)型肝(gān)炎病(bìng)毒(dú)拉米夫(fū)定(dìng)耐藥(yào)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015300 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸擴增部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測部分試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性。
乙型(xíng)肝炎(yán)病(bìng)毒(dú)拉米夫(fū)定(dìng)耐藥PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物與模板的正確結合是關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈的延(yán)伸是遵循鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引物(wù)的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫度(dù)下(xià)進行，結合的(dí)特異性大大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性地將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電泳分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細菌及培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
