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PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 規格 | 貨號 |
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玉(yù)米T PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015318 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有效期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可能會導致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結果。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守性。
玉(yù)米(mǐ)T PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區，其特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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