產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
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豬(zhū)鏈(liàn)球菌基因(yīn)分(fēn)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
50T |
YS-P015343 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測(cè)部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核一(yī)次，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測(cè)效能下降，可能(néng)會(huì)導致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
豬(zhū)鏈球菌(jūn)基因(yīn)分型PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以在較高的溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基因(yīn)片段也就能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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