產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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豬流行性腹(fù)瀉病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015345 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反復凍融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分的試劑一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降，可能(néng)會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
豬(zhū)流(liú)行(háng)性腹瀉(xiè)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物與模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則的(dí)。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特異(yì)性大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通過選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區(qū)，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定要用同位素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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