產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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豬(zhū)圓(yuán)環(huán)病(bìng)毒Ⅰ型PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015358 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸:低溫,避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效期一般為1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下(xià),產物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性,有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應小於等於(yú)35;
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試(shì)劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū),保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下(xià)降,可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。

②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
豬圓環病毒Ⅰ型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配對原則的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性,使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行,結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā),被(bèi)擴增的(dí)靶基因片段也就能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因區,其(qí)特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞;在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位);在(zài)細菌學(xué)中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次性地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu),即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在2~4 小時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一(yī)般用電(diàn)泳分析(xī),不(bù)一定(dìng)要用同位素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發,細(xì)胞,活PCR技術概論。
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