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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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轉(zhuǎn)基因(yīn)植(zhí)物(wù)cryA基(jī)因PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015363 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
轉(zhuǎn)基(jī)因植物(wù)cryA基因PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合及引物(wù)鏈的延伸是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反應中模板與引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位(wèi)素，無放(fàng)射性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論。
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