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核酸檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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豬(zhū)圓環病毒型/型(xíng)(PCV-/PCV-)核(hé)酸檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015614 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
豬(zhū)圓環病毒(dú)型/型(PCV-/PCV-)核酸檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) 其中引物(wù)與模(mó)板的正確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合及引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復性)可(kě)以在(zài)較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大(dà)增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待測模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將反應液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
