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核(hé)酸檢測試(shì)劑(jì)盒
商品屬性
| 產品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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腸道病(bìng)毒EV型(EV-)核(hé)酸(suān)檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015551 |
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引起的(dí)試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性。
腸(cháng)道(dào)病(bìng)毒EV型(xíng)(EV-)核酸檢測(cè)試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性)可以在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴增的靶基因片段也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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