簡介(jiè)：

PUC18/PUC18質(zhì)粒(lì)/BR 20微克Sigma-Aldrich
，Amresco
，Amersham
，Serva
，AppliChem等(děng)品牌(pái)， -20℃

詳細(xì)介紹：

中文名(míng)稱： PUC18

其他(tā)中文名稱(chēng)： PUC18質粒

產(chǎn)品規(guī)格： BR

包裝： 20微克(kè)

級別：BR

相關(guān)資料：

濃(nóng)度：450ug/ml

性狀：液體(tǐ)或(huò)粉(fěn)末(mò)。pUC18是(shì)適(shì)合於(yú)雙脫氧(yǎng)法(fǎ)DNA測序的載體(tǐ)，通常運用於(yú)重(zhòng)組dna的(dí)分子克(kè)隆中(zhōng)，首先我(wǒ)們(mén)製備大腸杆(gān)菌(jūn)的感受態(tài)細胞（能(néng)接受(shòu)外(wài)來(lái)重組(zǔ)的(dí)dna），這種感受態(tài)菌(jūn)株必須不同外來DNA分(fēn)子發生(shēng)遺傳重組，通常是(shì)rec基因(yīn)缺陷型的(dí)突變體，同(tóng)時它們(mén)必須(xū)是限(xiàn)製(zhì)係(xì)統(tǒng)缺陷或限製與(yǔ)修(xiū)飾(shì)係(xì)統均(jūn)缺陷的菌(jūn)株，即具有(yǒu)具(jù)有(yǒu)這三(sān)種(zhǒng)缺(quē)陷（rk mk rec ），同(tóng)時(shí)對(duì)氨苄青(qīng)黴素敏感（ap）。puc18載(zǎi)體(tǐ)自身帶(dài)有(yǒu)抗(kàng)氨(ān)苄青黴素(sù)基因，而外源片段不(bù)具有(yǒu)，這樣隻有帶(dài)有(yǒu)puc18的(dí)轉化子的菌株(zhū)才(cái)能(néng)在氨苄青黴素平(píng)板(bǎn)上(shàng)存(cún)活(huó)，而外源(yuán)片(piàn)段(duàn)自身(shēn)環化的不能存活(huó)，這(zhè)稱為抗性篩(shāi)選。pUC18 上帶有β-半乳(rǔ)糖苷(gān)酶基(jī)因(yīn)(lacZ)的調(tiáo)控序列和(hé)β-半乳糖苷(gān)酶(méi)N 端146 個氨基酸(suān)的(dí)編(biān)碼序(xù)列，在(zài)這個編碼區中(zhōng)插有(yǒu)一(yī)個多(duō)克隆(lóng)位點，且(qiě)不影響正常(cháng)功能，DH5α感(gǎn)受態(tài)菌株(zhū)帶有β-半乳糖苷(gān)酶C 端部(bù)分序(xù)列的編碼信(xìn)息(xī)，當puc18載(zǎi)體(tǐ)在正常(cháng)情況下同感受(shòu)態(tài)菌株融合後，互(hù)補(bǔ)表(biǎo)達具有(yǒu)酶(méi)活性的蛋白(bái)質(zhì)，稱(chēng)為α-互補現(xiàn)象，當(dāng)有外源片(piàn)段插(chā)入多克隆(lóng)位點後，互補現象消失，其(qí)形(xíng)成的(dí)菌株顏色(sè)具(jù)有很大(dà)的(dí)差異(yì)，很容易鑒(jiàn)別，這(zhè)種(zhǒng)篩選(xuǎn)方法(fǎ)稱(chēng)為α-互補現象篩選。由上可(kě)見，puc18載體除了能重(zhòng)組導入(rù)外(wài)源(yuán)片(piàn)段(duàn)外(wài)，在(zài)篩選表達(dá)過(guò)程(chéng)中(zhōng)還具有(yǒu)重要(yào)的(dí)作用(yòng)

用(yòng)途(tú)：生化研(yán)究。克(kè)隆外(wài)源基因。利(lì)用lac promoter進(jìn)行基因(yīn)表(biǎo)達(dá)。使(shǐ)用M13 primers進(jìn)行DNA測(cè)序。

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