測定(dìng)意義(yì)

活性(xìng)氧(Reactive oxygen species, ROS)包括(kuò)超(chāo)氧(yǎng)自由(yóu)基(jī)，過(guò)氧化(huà)氫，及其(qí)下(xià)遊產物過(guò)氧(yǎng)化(huà)物和羥(qiǎng)化物(wù)等(děng)，研究(jiū)表(biǎo)明，機(jī)體(tǐ)95％以上的(dí)活性氧(yǎng)（ROS）都來(lái)自(zì)於綫粒體(tǐ)，其(qí)失衡(héng)所致的氧化應(yīng)激(jī)與(yǔ)細胞生(shēng)長增殖，發(fā)育(yù)分化(huà)，衰老(lǎo)和凋亡以(yǐ)及許(xǔ)多生理和(hé)病理(lǐ)過(guò)程有關。

正常情況(kuàng)下，細胞內抗氧(yǎng)化防御係統與氧自(zì)由(yóu)基處(chǔ)於平衡狀(zhuàng)態，細(xì)胞內活性(xìng)氧(yǎng)（ROS）水(shuǐ)平維(wéi)持在較(jiào)低的生理範圍；在(zài)病(bìng)理情況下，細胞(bāo)內抗氧(yǎng)化係統(tǒng)與氧自由基(jī)的(dí)平(píng)衡(héng)被打(dǎ)破(pò)，細胞內活性氧水(shuǐ)平過多(duō)，就可破壞(huài)綫粒體酶(méi)類，脂類和核(hé)酸，使機體(tǐ)出現氧(yǎng)化(huà)應激，同時(shí)，活性氧還可(kě)攻(gōng)擊綫粒體DNA產生(shēng)氧化(huà)損傷(shāng)，導致(zhì)綫粒體ATP合成減(jiǎn)少(shǎo)，綫粒(lì)體膜(mó)電(diàn)位(wèi)破壞(huài)等結構和(hé)功能(néng)變(biàn)化(huà)。

因此，通(tōng)過檢(jiǎn)測活(huó)性氧的變化(huà)來(lái)判斷(duàn)綫粒(lì)體的功能是(shì)否(fǒu)正常(cháng)具有重要意(yì)義。

熒(yíng)光探(tàn)針(zhēn)-還(huán)原型二(èr)氯(lǜ)熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過綫(xiàn)粒體膜，在綫粒(lì)體內被(bèi)酯(zhǐ)酶水解，形成(chéng)無熒光的(dí)DCFH，DCFH迅速與ROS反(fǎn)應(yīng)生成(chéng)熒光物—氧化型二氯熒(yíng)光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據上(shàng)述(shù)原理設計了(liǎo)利用熒光(guāng)法直(zhí)接定量檢測綫(xiàn)粒(lì)體ROS產(chǎn)生(shēng)速率的方法。將(jiāng)熒光強(qiáng)度隨(suí)時(shí)間變化(huà)的數據點擬(nǐ)合，綫性(xìng)回歸直綫(xiàn)斜率(shuài)與(yǔ)ROS產生的(dí)速率呈正(zhèng)比。

多功(gōng)能(néng)酶標(biāo)儀，恒(héng)溫培(péi)養(yǎng)箱，分(fēn)析天(tiān)平(píng)，可(kě)調式移液(yè)器(qì)，冰，蒸餾水。