技術文(wén)獻(xiàn)
技術文獻
📌 概述(shù)
PCR產物(wù)為(wéi)雙鏈DNA分子(zǐ),其(qí)穩定性受溫度(dù)影響極(jí)大。高(gāo)溫會加(jiā)速水(shuǐ)解反(fǎn)應和酶促降解,導致DNA斷(duàn)裂;低(dī)溫則能(néng)有效抑製(zhì)這些過程(chéng)。因此,選(xuǎn)擇合適的保存溫度(dù)是確(què)保(bǎo)後續克隆,測(cè)序或電(diàn)泳實驗成功的關(guān)鍵。
🌡️ 不(bù)同溫(wēn)度下的穩(wěn)定性表(biǎo)現
以下(xià)表(biǎo)格總(zǒng)結了PCR產(chǎn)物(wù)在不(bù)同溫(wēn)度條件(jiàn)下(xià)的穩定性(xìng)和推薦保(bǎo)存(cún)時(shí)長:
(補充說(shuō)明)有(yǒu)研(yán)究表(biǎo)明,DNA比(bǐ)RNA更(gēng)耐熱(rè),短時(shí)間室(shì)溫(wēn)放(fàng)置(zhì)不會立(lì)即完(wán)全(quán)降解,但仍可能出(chū)現(xiàn)彌散(sàn)條(tiáo)帶或(huò)產(chǎn)量下降(jiàng)的現象 。
此(cǐ)外:若將(jiāng)PCR產(chǎn)物(wù)溶(róng)於(yú)Tris緩(huǎn)衝液而非純水,可(kě)在-20℃下(xià)延(yán)長(cháng)保存(cún)時(shí)間至(zhì)1–2個月,因緩衝(chōng)液能提(tí)供(gōng)更穩定(dìng)的(dí)pH環境 ()]。
采(cǎi)用真(zhēn)空(kōng)幹(gān)燥後(hòu)凍存(cún)的方(fāng)法,可使PCR產(chǎn)物在-20℃下保(bǎo)存長(cháng)達(dá)一(yī)兩年(nián)。
✅ 建議(yì)
為保(bǎo)證PCR產物(wù)的(dí)最(zuì)佳穩(wěn)定(dìng)性:
長(cháng)期(qī)保(bǎo)存:優先(xiān)選擇-20℃或(huò)-80℃,並分裝(zhuāng)避免反復凍融(róng);
短期(qī)使用:4℃存(cún)放(fàng)不超(chāo)過(guò)3天;
立即使(shǐ)用:可(kě)在室溫(wēn)短暫(zàn)放置,但應控(kòng)製(zhì)在(zài)48小(xiǎo)時內(nèi) 。
