大鼠腸(cháng)間質(zhì)細(xì)胞

本(běn)細胞分離(lí)自大鼠小腸(cháng)或(huò)結(jié)腸(cháng)組(zǔ)織。腸間(jiān)質細(xì)胞（Interstitial Cells of Cajal, ICC）是腸(cháng)道蠕動(dòng)的(dí)“起(qǐ)搏細(xì)胞”，負(fù)責產生(shēng)慢(màn)波電位(wèi)，調(tiáo)控腸(cháng)道平(píng)滑肌(jī)的節律(lǜ)性(xìng)收縮。其通(tōng)過(guò)與神經元，平滑(huá)肌細胞(bāo)形成復雜(zá)的網絡結構(gòu)，參(cān)與腸(cháng)道動力(lì)調(tiáo)節，神經信號(hào)轉導(dǎo)及腸道免疫(yì)微(wēi)環(huán)境維持。功能(néng)異常與腸易激綜(zōng)合征，慢(màn)性便(biàn)秘，腸(cháng)梗(gěng)阻等疾病(bìng)密切相關(guān)。大鼠腸(cháng)間質細(xì)胞(bāo)原(yuán)代培(péi)養3-5天後貼(tiē)壁，呈(chéng)梭(suō)形(xíng)或星形，具(jù)有(yǒu)典(diǎn)型(xíng)的雙極或多(duō)極(jí)突(tū)起；傳代後可穩定(dìng)維持(chí)ICC的形(xíng)態和(hé)功(gōng)能(néng)特(tè)征。該(gāi)細(xì)胞是研(yán)究腸(cháng)道(dào)動力機(jī)製(zhì)，神(shén)經-腸軸調控(kòng)及(jí)相關(guān)疾病的(dí)重(zhòng)要實(shí)驗材料。

培養基
：大(dà)鼠腸間質(zhì)細(xì)胞完(wán)全(quán)培養(yǎng)基（含(hán)FBS，幹細(xì)胞(bāo)因子SCF，EGF，Penicillin，Streptomycin等）

換液頻(pín)率(shuài)
：每2-3天(tiān)換(huàn)液一次

生長特(tè)性
：貼壁生長，呈(chéng)網絡狀排(pái)列

細胞形(xíng)態
：梭(suō)形，星(xīng)形，具有細(xì)長突(tū)起

傳代比例
：1:2

傳代(dài)特性(xìng)
：可傳(chuán)3-5代；2-3代(dài)以(yǐ)內細胞(bāo)功(gōng)能最(zuì)佳(jiā)

消化液(yè)
：0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶-EDTA消化(huà)液（溫(wēn)和消(xiāo)化）

大鼠腸(cháng)間質細胞體外培養周期有限；建議使用配(pèi)套的(dí)專用生(shēng)長(cháng)培養基(jī)及正確的操作方(fāng)法來培養，以此(cǐ)保(bǎo)證(zhèng)該細胞的最佳培(péi)養狀態(tài)。

方法簡介(jiè)
：實驗(yàn)室采(cǎi)用膠原(yuán)酶(méi)-胰(yí)蛋白酶聯合消(xiāo)化法(fǎ)結(jié)合密度梯(tī)度離(lí)心法及免疫磁(cí)珠分選(xuǎn)法（基於c-Kit標誌物）製備(bèi)該細(xì)胞，細胞(bāo)總量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量(liáng)檢(jiǎn)測
：經腸(cháng)間質細(xì)胞特(tè)異(yì)性標(biāo)誌物（c-Kit，ANO1，Vimentin）免疫熒(yíng)光(guāng)鑒定(dìng)，本細胞純(chún)度(dù)可達90%以(yǐ)上(shàng)；經(jīng)慢(màn)波(bō)電位(wèi)記錄或鈣成(chéng)像(xiàng)實驗(yàn)驗證(zhèng)起搏(bó)功能；經(jīng)檢(jiǎn)測(cè)不含有支原體，細菌，酵(jiào)母和(hé)真菌等(děng)外源汙(wū)染物，細(xì)胞(bāo)活性良好。