大鼠(shǔ)骨骼(gé)肌衛(wèi)星細胞(bāo)

大鼠骨(gǔ)骼(gé)肌衛(wèi)星細(xì)胞分(fēn)離(lí)自四肢肌(jī)肉(ròu)組織；骨(gǔ)骼(gé)肌(jī)又稱(chēng)橫紋(wén)肌，肌肉中的(dí)一種(zhǒng)，約占全(quán)身(shēn)重(zhòng)量(liáng)的40%。骨(gǔ)骼(gé)肌(jī)纖維(wéi)為長柱形(xíng)的(dí)多核(hé)細胞(bāo)，肌膜(mó)的外(wài)麵(miàn)有(yǒu)基膜(mó)緊(jǐn)密(mì)貼(tiē)附。屬(shǔ)於(yú)橫(héng)紋肌，橫紋肌還(huán)包括心(xīn)肌與內髒橫紋(wén)肌(jī)，其(qí)中(zhōng)骨(gǔ)骼肌(jī)主要分布(bù)於四肢。每塊肌(jī)肉(ròu)都是具(jù)有一(yī)定(dìng)形(xíng)態(tài)
，結(jié)構和功能的(dí)器官，有(yǒu)豐富(fù)的血(xiě)管(guǎn)
，淋(lín)巴(bā)分布(bù)，在(zài)軀(qū)體(tǐ)神(shén)經(jīng)支配(pèi)下收(shōu)縮或舒張，進行隨(suí)意(yì)運動。肌(jī)肉(ròu)可(kě)根據共形狀
，大(dà)小
，位置
，起止(zhǐ)點(diǎn)
，纖(xiān)維(wéi)方向和(hé)作(zuò)用等命名(míng)。依(yī)形(xíng)態(tài)命名的如斜(xié)方(fāng)肌(jī)
，菱形(xíng)肌
，三(sān)角肌
，梨狀(zhuàng)肌(jī)等(děng)。骨(gǔ)骼肌細胞呈纖維狀，不分支(zhī)，有(yǒu)明顯橫(héng)紋(wén)，核(hé)很多，且(qiě)都(dū)位(wèi)於(yú)細胞膜下(xià)方(fāng)。肌細胞內(nèi)有許多(duō)沿細(xì)胞(bāo)長(cháng)軸平行排(pái)列的細(xì)絲狀肌(jī)原纖維(wéi)。每(měi)一(yī)肌(jī)原纖維都有(yǒu)相間(jiān)排(pái)列的明帶（Ⅰ帶(dài)）及暗帶(dài)（A帶）。明(míng)帶染色較(jiào)淺，而暗帶染(rǎn)色(sè)較(jiào)深(shēn)。暗帶(dài)中間有一條(tiáo)較(jiào)明亮的綫(xiàn)稱(chēng)H綫。H綫的中(zhōng)部有一(yī)M綫。明帶(dài)中間，有(yǒu)一(yī)條(tiáo)較(jiào)暗(àn)的(dí)綫稱為(wéi)Z綫(xiàn)。兩個(gè)Z綫(xiàn)之間(jiān)的(dí)區(qū)段，叫(jiào)做(zuò)一(yī)個肌(jī)節(jié)。肌衛(wèi)星(xīng)細(xì)胞(bāo)指(zhǐ)骨(gǔ)骼肌(jī)中除骨骼(gé)肌纖維（肌(jī)細胞(bāo)）外的(dí)一(yī)種(zhǒng)扁平
，有突(tū)起的(dí)細(xì)胞(bāo)。著於(yú)肌(jī)纖(xiān)維（肌(jī)細胞）表(biǎo)麵；當(dāng)肌纖維(wéi)（肌(jī)細胞(bāo)）受(shòu)損後(hòu)，肌衛星細(xì)胞可(kě)增殖分化，參(cān)與肌纖維(wéi)（肌(jī)細胞）的(dí)修(xiū)復(fù)，因(yīn)此具有(yǒu)幹細胞(bāo)性質(zhì)。

自備試劑： 0.25%胰蛋白酶  
， 多聚(jù)-L-賴(lài)氨酸溶(róng)液(yè)（1×）或(huò)多聚(jù)-L-賴氨(ān)酸溶液（10×）  
，PBS  
，完全(quán)培養基(jī)

包(bāo)被(bèi)條(tiáo)件： PLL（0.1 mg/mL）

培養基(jī)： 大鼠骨(gǔ)骼(gé)肌衛(wèi)星(xīng)細胞(bāo)完全培養基(jī)(含(hán)FBS
，生長(cháng)添(tiān)加劑
，Penicillin
，Streptomycin等)

換液頻率： 每(měi)2-3天(tiān)換液一次(cì)

生長特性： 貼壁(bì)生長

細(xì)胞形(xíng)態(tài)： 成纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)樣

傳代比(bǐ)例(lì)： 1:2

傳(chuán)代(dài)特性： 可傳(chuán)3-5代(dài)左(zuǒ)右(yòu)；3代以(yǐ)內狀(zhuàng)態(tài)最(zuì)佳

消(xiāo)化液： 0.25%胰(yí)蛋(dàn)白酶

大(dà)鼠骨骼肌衛星(xīng)細胞體外(wài)培養周(zhōu)期有限(xiàn)；建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用配(pèi)套(tào)的專用生長培(péi)養基及正確(què)的操作方法來(lái)培(péi)養(yǎng)，以此保(bǎo)證該細胞的最(zuì)佳培養狀態(tài)。

方(fāng)法簡(jiǎn)介 實(shí)驗室分離(lí)的大(dà)鼠骨骼肌(jī)衛星(xīng)細(xì)胞(bāo)采用胰(yí)蛋白(bái)酶(méi)-膠原酶混合(hé)消(xiāo)化法結合多次差速(sù)貼壁(bì)法製(zhì)備(bèi)而來，細胞總量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢(jiǎn)測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分(fēn)離(lí)的大鼠骨骼肌衛星(xīng)細胞經Desmin免(miǎn)疫熒(yíng)光鑒定，純(chún)度可(kě)達(dá)90%以上(shàng)，且(qiě)不含有HIV-1
，HBV
，HCV
，支(zhī)原(yuán)體
，細(xì)菌
，酵母(mǔ)和真菌等(děng)。