大鼠(shǔ)滑膜細(xì)胞（A型(xíng)）

大鼠(shǔ)滑(huá)膜細(xì)胞（A型）分離自(zì)大鼠(shǔ)關(guān)節滑膜(mó)組織。滑膜(mó)是(shì)覆蓋關(guān)節(jié)囊內(nèi)壁的結(jié)締組織膜，滑(huá)膜細胞(bāo)主要分為(wéi)A型（巨噬細(xì)胞(bāo)樣滑膜細胞）和B型(xíng)（成(chéng)纖維細(xì)胞(bāo)樣(yàng)滑膜(mó)細胞(bāo)），其(qí)中A型(xíng)滑(huá)膜(mó)細(xì)胞(bāo)是(shì)滑膜組(zǔ)織中(zhōng)的免疫相(xiāng)關(guān)細胞，起源於單(dān)核(hé)巨(jù)噬細胞係統(tǒng)，核(hé)心(xīn)功能為吞(tūn)噬清除關(guān)節腔內(nèi)的異(yì)物(wù)
，凋亡(wáng)細(xì)胞及(jí)代謝廢物，同時(shí)分泌(mì)溶菌(jūn)酶(méi)
，補(bǔ)體等免疫(yì)活(huó)性物(wù)質(zhì)，參(cān)與關節局部免(miǎn)疫應答(dá)和(hé)炎(yán)症(zhèng)調控，在維(wéi)持關(guān)節腔微(wēi)環境穩態中發(fā)揮關鍵作(zuò)用。其功能異(yì)常或過(guò)度(dù)激活會導致炎(yán)症因子(zǐ)大量釋放，參(cān)與(yǔ)類風濕(shī)關(guān)節炎(yán)等自身(shēn)免疫(yì)性關(guān)節(jié)疾病(bìng)的(dí)病理進程。大鼠(shǔ)滑膜細(xì)胞(bāo)（A型(xíng)）原(yuán)代培(péi)養2-3天(tiān)後(hòu)開始(shǐ)貼壁，初(chū)始形(xíng)態(tài)呈(chéng)圓形或不(bù)規則(zé)形，胞漿(jiāng)豐(fēng)富，部分帶有偽足
；培(péi)養(yǎng)5-7天(tiān)細胞逐(zhú)漸穩(wěn)定(dìng)
；傳(chuán)代後可(kě)穩定維持A型(xíng)滑膜細(xì)胞(bāo)的典型(xíng)形(xíng)態及吞(tūn)噬功能(néng)。該細(xì)胞是研(yán)究關(guān)節局部(bù)免(miǎn)疫機(jī)製(zhì)
，自身免疫性(xìng)關節炎發病機製(zhì)及關(guān)節(jié)疾病(bìng)治療(liáo)靶點篩選的(dí)重要實(shí)驗(yàn)材(cái)料。

自備試劑(jì)：0.25%胰蛋(dàn)白酶
，膠原(yuán)酶(méi)Ⅱ型
，PBS緩衝(chōng)液(yè)
，完(wán)全培養基(jī)
，免(miǎn)疫磁(cí)珠分(fēn)選(xuǎn)試(shì)劑

培養(yǎng)基：大(dà)鼠滑膜(mó)細胞(bāo)（A型(xíng)）完全培(péi)養(yǎng)基（含FBS
，巨噬(shì)細胞集落刺激因子
，Penicillin
，Streptomycin等(děng)）

生長(cháng)特性(xìng)：貼壁(bì)生長(cháng)，具(jù)有黏(nián)附(fù)性和吞噬(shì)活性

細(xì)胞形(xíng)態(tài)：圓形
，不(bù)規(guī)則形，部(bù)分(fēn)帶有偽(wěi)足

傳代比(bǐ)例(lì)：1:2

傳(chuán)代特性：可傳(chuán)3-5代
；2-3代以(yǐ)內(nèi)細胞功能(néng)最穩定(dìng)

消(xiāo)化液(yè)：0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶

大鼠(shǔ)滑膜(mó)細(xì)胞（A型）體外(wài)培養(yǎng)周期(qī)有(yǒu)限
；建(jiàn)議(yì)使(shǐ)用(yòng)配套(tào)的專(zhuān)用生(shēng)長培(péi)養基及正確(què)的操作方法來培養(yǎng)，以(yǐ)此(cǐ)保(bǎo)證該細胞的(dí)最(zuì)佳培(péi)養狀態。

方法簡(jiǎn)介：實驗(yàn)室(shì)采用胰(yí)蛋白(bái)酶(méi)-膠原(yuán)酶聯(lián)合(hé)消化法(fǎ)結合差(chà)速(sù)貼壁(bì)法及免(miǎn)疫磁珠(zhū)分選法(fǎ)製備(bèi)該(gāi)細胞(bāo)，細胞總(zǒng)量約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質量檢測：經(jīng)A型滑膜(mó)細胞特異(yì)性(xìng)標(biāo)誌物(wù)（CD68
，F4/80）免(miǎn)疫熒光鑒(jiàn)定(dìng)，本細胞純(chún)度可達90%以(yǐ)上
；經吞噬實驗驗(yàn)證(zhèng)細胞(bāo)功能(néng)正常(cháng)
；經(jīng)檢(jiǎn)測不含有HIV-1
，HBV
，HCV
，支(zhī)原體(tǐ)
，細菌
，酵母(mǔ)和(hé)真(zhēn)菌等(děng)外(wài)源汙染(rǎn)物，細(xì)胞(bāo)活性達標。