大鼠結(jié)腸(cháng)成纖維細胞

大(dà)鼠結(jié)腸成纖維細胞分離自結腸組織；結(jié)腸(cháng)在右(yòu)髂(qià)窩內續於盲(máng)腸(cháng)
，在第3骶椎(zhuī)平麵連接直(zhí)腸(cháng)。結腸(cháng)分升(shēng)結腸，橫結(jié)腸，降(jiàng)結(jié)腸和乙狀(zhuàng)結(jié)腸4部分(fēn)
，大部分固定(dìng)於腹後壁
，結(jié)腸的排列(liè)酷似(sì)英文字母“M”
，將小腸(cháng)包圍在內(nèi)。結腸(cháng)橫(héng)切(qiē)麵(miàn)由(yóu)內到外依(yī)次為黏(nián)膜(mó)（上皮層，固有層(céng)，黏(nián)膜(mó)肌(jī)層(céng)）
，黏(nián)膜下層（疏鬆結締組織）
，肌層(céng)（內(nèi)環(huán)形，外縱行兩(liǎng)層平滑肌）
，外膜（纖維(wéi)膜或漿膜(mó)）。結(jié)腸成纖維細胞主要分布(bù)於外(wài)膜（纖(xiān)維膜(mó)或漿膜）結(jié)締組(zǔ)織(zhī)內。成(chéng)纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)對(duì)不同程(chéng)度的(dí)細(xì)胞變性(xìng)，壞死(sǐ)和(hé)組織缺損(sǔn)的修復有著十分重要(yào)的作(zuò)用。剛分(fēn)離(lí)的結腸成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)呈圓(yuán)形，折光(guāng)性(xìng)良好(hǎo)
，懸(xuán)浮於培養(yǎng)基(jī)中。30 min細胞貼(tiē)壁
，其中部分開始伸(shēn)出偽(wěi)足
，表(biǎo)現(xiàn)為(wéi)小(xiǎo)的突起(qǐ)；6 h後細胞(bāo)基本貼壁完(wán)全
，伸(shēn)展(zhǎn)成梭形
，胞(bāo)核清(qīng)晰
，分(fēn)布(bù)較(jiào)均匀(yún)
，散在生長(cháng)
，不(bù)聚(jù)集成團(tuán)；細胞生(shēng)長(cháng)迅速
，5-7天(tiān)即呈融合狀態(tài)
，細(xì)胞排列緊(jǐn)密
，有(yǒu)的交叉重(zhòng)疊生長
，平(píng)坦(tǎn)，胞(bāo)體(tǐ)較大
，細胞質透明
，細(xì)胞核較(jiào)大
，呈橢圓(yuán)形(xíng)
，顏色淡(dàn)。細胞融合
，並(bìng)彼(bǐ)此(cǐ)連(lián)接成網狀；細胞(bāo)呈(chéng)突(tū)起(qǐ)的(dí)紡錘形(xíng)或星形的(dí)扁平分布。

自(zì)備試劑： 0.25%胰蛋白酶  ，PBS  ，完全培(péi)養(yǎng)基(jī)

培養(yǎng)基： 大鼠結(jié)腸(cháng)成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)完全培養基(jī)(基礎培養(yǎng)基
，含(hán)FBS，bFGF，Insulin，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換液(yè)頻(pín)率： 每2-3天(tiān)換液(yè)一次

生(shēng)長特性： 貼壁

細胞(bāo)形(xíng)態： 成(chéng)纖維細胞(bāo)樣

傳代(dài)比例(lì)： 1:2

傳代特(tè)性(xìng)： 可傳3代(dài)左右(yòu)

消化液： 0.25%胰(yí)蛋白(bái)酶

大鼠結(jié)腸成(chéng)纖(xiān)維細胞體(tǐ)外(wài)培(péi)養周期有(yǒu)限；建(jiàn)議使用配套的(dí)專(zhuān)用(yòng)生(shēng)長培養基(jī)及(jí)正確的操作方法來(lái)培(péi)養(yǎng)
，以此保證該(gāi)細(xì)胞(bāo)的最佳培(péi)養狀(zhuàng)態(tài)。

方法(fǎ)簡(jiǎn)介(jiè) 實驗室分(fēn)離(lí)的大鼠結腸成纖維(wéi)細(xì)胞采用胰(yí)蛋(dàn)白酶-膠原酶混合消(xiāo)化(huà)法結(jié)合差速貼壁(bì)法(fǎ)製備而來(lái)
，細胞總量(liáng)約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測 實(shí)驗室分離的(dí)大鼠(shǔ)結(jié)腸成纖(xiān)維細胞經Vimentin免(miǎn)疫(yì)熒光鑒(jiàn)定(dìng)
，純度(dù)可達(dá)90%以上
，且不含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原體(tǐ)，細菌(jūn)，酵(jiào)母和真菌等。