人口腔(qiāng)粘膜(mó)成(chéng)纖維(wéi)細胞(bāo)

人(rén)口(kǒu)腔粘(nián)膜(mó)成(chéng)纖維細(xì)胞分離自(zì)人(rén)口(kǒu)腔粘(nián)膜固(gù)有層(céng)組(zǔ)織
。口腔(qiāng)粘膜成纖維(wéi)細(xì)胞是口腔(qiāng)粘(nián)膜固(gù)有(yǒu)層的(dí)主要(yào)功(gōng)能細胞，核(hé)心(xīn)功能(néng)為合成和分泌(mì)膠(jiāo)原蛋白，彈性(xìng)纖維及細(xì)胞(bāo)外(wài)基質，維持口腔(qiāng)粘(nián)膜(mó)的結構完(wán)整性，彈性與機械韌(rèn)性
。其可分泌多(duō)種生長因(yīn)子和(hé)細胞因(yīn)子，調(tiáo)控口(kǒu)腔(qiāng)粘(nián)膜上皮(pí)細胞的(dí)增殖(zhí)，分(fēn)化(huà)與遷(qiān)移，參(cān)與(yǔ)口(kǒu)腔粘膜損傷修(xiū)復和創麵愈合(hé)過(guò)程；同時維(wéi)持(chí)口腔微環境(jìng)穩態(tài)，功能異常與口(kǒu)腔(qiāng)粘膜潰瘍(yáng)，口腔粘(nián)膜纖維化(huà)，口腔癌(ái)相(xiāng)關纖維(wéi)化等(děng)疾病(bìng)密(mì)切(qiē)相關
。人(rén)口腔(qiāng)粘(nián)膜(mó)成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞原代培養2-3天(tiān)後(hòu)開始(shǐ)貼壁，初(chū)始形態呈(chéng)短梭(suō)形或不規則(zé)形；培(péi)養(yǎng)5-7天(tiān)細(xì)胞(bāo)逐漸(jiàn)匯(huì)合，呈長梭形，排列成旋(xuán)渦(wō)狀(zhuàng)或放(fàng)射狀(zhuàng)；傳(chuán)代(dài)後細胞(bāo)生長旺盛(shèng)，可(kě)穩定維(wéi)持成纖維細(xì)胞(bāo)的典(diǎn)型形態學特(tè)征和生理(lǐ)功(gōng)能(néng)
。該(gāi)細(xì)胞(bāo)是(shì)研(yán)究人類(lèi)口腔(qiāng)粘膜生理機製(zhì)，口(kǒu)腔粘(nián)膜(mó)損傷(shāng)修復(fù)，口(kǒu)腔疾(jí)病發病機製及(jí)口(kǒu)腔藥物篩(shāi)選的理想(xiǎng)實驗材料
。

自備試劑(jì)：0.25%胰蛋(dàn)白酶(méi)，膠(jiāo)原(yuán)酶(méi)Ⅰ型(xíng)，PBS緩衝液(yè)，完全培養(yǎng)基(jī)

培養基(jī)：人口腔粘膜成纖(xiān)維(wéi)細胞完全培(péi)養基（含FBS，成(chéng)纖維(wéi)細胞生長因(yīn)子，維生素C，Penicillin，Streptomycin等）

換液(yè)頻(pín)率(shuài)：每2-3天換液(yè)一次(cì)

生長特(tè)性：貼壁生(shēng)長(cháng)

細(xì)胞(bāo)形(xíng)態：長梭(suō)形，短梭形

傳代(dài)比例：1:2-1:3

傳代(dài)特性(xìng)：可穩(wěn)定傳代6-8代；3-5代以內(nèi)細胞狀(zhuàng)態最(zuì)佳(jiā)，功能最(zuì)穩定

消化液：0.25%胰蛋白(bái)酶(méi)

人(rén)口(kǒu)腔粘(nián)膜成纖維細(xì)胞體(tǐ)外(wài)培養(yǎng)周(zhōu)期有限(xiàn)；建(jiàn)議使(shǐ)用配(pèi)套的專(zhuān)用生(shēng)長(cháng)培(péi)養基及(jí)正確的(dí)操作方(fāng)法來培(péi)養(yǎng)，以此(cǐ)保證該細胞(bāo)的最(zuì)佳培養(yǎng)狀態(tài)
。

方法(fǎ)簡介：實驗室(shì)采用(yòng)胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶-膠原(yuán)酶(méi)聯合消化法結合差(chà)速貼壁(bì)法(fǎ)製備(bèi)該(gāi)細胞，細(xì)胞(bāo)總(zǒng)量(liáng)約(yuē)為5×10⁵ cells/瓶
。

質量(liáng)檢測：經(jīng)成纖維細胞特異(yì)性(xìng)標誌(zhì)物(wù)（波形蛋白(bái)Vimentin，FSP1）免疫(yì)熒(yíng)光鑒定(dìng)，本(běn)細胞(bāo)純度(dù)可達90%以上(shàng)；經(jīng)細胞外(wài)基質(zhì)分(fēn)泌(mì)檢測(cè)驗(yàn)證細(xì)胞(bāo)功(gōng)能(néng)正(zhèng)常；經(jīng)檢(jiǎn)測(cè)不含(hán)有HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體(tǐ)，細菌，酵(jiào)母和(hé)真菌等外(wài)源汙染物，細胞活性(xìng)達標
。