人(rén)卵巢(cháo)微(wēi)血管內皮細胞

人卵(luǎn)巢微血(xiě)管內(nèi)皮細胞(bāo)分(fēn)離自卵巢(cháo)組織；卵(luǎn)巢是雌(cí)性動物的生殖(zhí)器官(guān)
，卵巢的功能(néng)是(shì)產生(shēng)卵(luǎn)以及類(lèi)固(gù)醇(chún)激素。卵(luǎn)巢的位置與睾丸(wán)相同(tóng)
，僅左側發(fā)育(yù)（右(yòu)側(cè)已(yǐ)退化）
，呈(chéng)葡萄狀
，均為處於不同發(fā)育(yù)時期的卵泡
，卵泡(pào)呈黃色(sè)
，卵巢表麵密(mì)布(bù)血管(guǎn)。卵(luǎn)巢的大(dà)小(xiǎo)與(yǔ)年齡和產卵(luǎn)期有(yǒu)關。大多數脊椎動(dòng)物(wù)有(yǒu)兩個卵巢
，但是部分(fēn)魚類(lèi)的兩(liǎng)個卵(luǎn)巢融合為單個結構(gòu)
，而所(suǒ)有鳥(niǎo)類隻有左(zuǒ)側卵巢有機能(néng)。卵(luǎn)巢是位(wèi)於子宮兩(liǎng)側(cè)的一(yī)對(duì)卵(luǎn)圓形(xíng)的生(shēng)殖器官(guān)
，它(tā)的外表(biǎo)有(yǒu)一層上皮組(zǔ)織
，其(qí)下方(fāng)有薄(báo)層的結締(dì)組(zǔ)織。卵巢的內(nèi)部(bù)結構可(kě)分為皮質和(hé)髓質。皮(pí)質位(wèi)於(yú)卵巢的周(zhōu)圍部分(fēn)
，主(zhǔ)要(yào)由(yóu)卵(luǎn)泡和結(jié)締(dì)組(zǔ)織構成(chéng)；髓質位於中央
，由疏鬆結締組織構(gòu)成
，其中有(yǒu)許(xǔ)多血管(guǎn)，淋(lín)巴(bā)管(guǎn)和神(shén)經。微(wēi)血(xiě)管又稱(chēng)毛(máo)細(xì)血(xiě)管(guǎn)。分(fēn)布(bù)於各(gè)種組(zǔ)織和細胞間的最微細的血管。介於微動脈(mài)和微靜脈(mài)之間。平均直徑(jìng)7-9微(wēi)米(mǐ)
，數量極多
，成網(wǎng)狀(zhuàng)分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞(bāo)及一(yī)薄層(céng)基膜(mó)組成(chéng)
，厚(hòu)約(yuē)0.5微米(mǐ)。基膜(mó)外(wài)麵(miàn)有(yǒu)薄層結締(dì)組(zǔ)織
，其(qí)中有(yǒu)纖維細胞，巨噬(shì)細(xì)胞和(hé)周細胞(bāo)等(děng)。最(zuì)細的(dí)微(wēi)血(xiě)管由(yóu)一個內皮(pí)細(xì)胞圍(wéi)成管腔(qiāng)
，較粗(cū)的微(wēi)血(xiě)管(guǎn)由2-3個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞(bāo)圍(wéi)成。分布於肌(jī)肉組(zǔ)織，神(shén)經(jīng)組(zǔ)織和結締(dì)組(zǔ)織中的微(wēi)血管(guǎn)
，內(nèi)皮細(xì)胞(bāo)間為(wéi)縫隙(xì)連接（縫隙寬150埃）
，稱連續微血管。血管(guǎn)內皮細(xì)胞(bāo)在器官(guān)和組(zǔ)織的結(jié)構(gòu)和功能上起(qǐ)著非常(cháng)重要的作(zuò)用。並(bìng)與多種疾(jí)病的發(fā)生(shēng)與發(fā)展有關。近(jìn)年(nián)來血管內皮(pí)細(xì)胞(bāo)在炎症(zhèng)，休(xiū)克(kè)等(děng)一(yī)係(xì)列病理生理(lǐ)改(gǎi)變中的重要性(xìng)愈(yù)來愈受到(dào)人們(mén)的(dí)重視。研(yán)究發現
，不同來源(yuán)的(dí)內(nèi)皮(pí)細(xì)胞(bāo)在(zài)生物學(xué)特征，結(jié)構和功能(néng)等方麵(miàn)均存(cún)在(zài)一定(dìng)差別
，而同是微血管內皮細胞
，它們又(yòu)存在器官和組織的特異(yì)性。

自備(bèi)試(shì)劑
： 0.25%胰蛋白酶  ，多聚(jù)-L-賴氨酸溶(róng)液（1×）或多聚-L-賴氨(ān)酸溶(róng)液(yè)（10×）或明(míng)膠(jiāo)包(bāo)被液（1 mg/mL）  ，PBS  ，完(wán)全培(péi)養基

包(bāo)被(bèi)條(tiáo)件
： PLL（0.1 mg/mL）或明膠(jiāo)（0.1%）

培(péi)養基
： 人卵巢微(wēi)血管內(nèi)皮細胞完(wán)全(quán)培養(yǎng)基(含(hán)FBS，生(shēng)長(cháng)添加劑(jì)，Penicillin，Streptomycin等(děng))

換(huàn)液頻率
： 每(měi)2-3天換(huàn)液一(yī)次

生(shēng)長特(tè)性
： 貼(tiē)壁

細胞形(xíng)態
： 內皮(pí)細胞樣(yàng)

傳代比例
： 1:2

傳代特性
： 可傳(chuán)3代左右

消化(huà)液
： 0.25%胰(yí)蛋白酶(méi)

人卵巢微血(xiě)管內(nèi)皮(pí)細(xì)胞體(tǐ)外(wài)培(péi)養周(zhōu)期有限；建(jiàn)議使用(yòng)配套的專(zhuān)用(yòng)生長(cháng)培養基(jī)及(jí)正確的(dí)操(cāo)作(zuò)方法來培養
，以此保(bǎo)證(zhèng)該細(xì)胞的最佳培(péi)養狀態。

方(fāng)法簡介 實驗(yàn)室分離的人(rén)卵巢(cháo)微(wēi)血管內(nèi)皮細胞(bāo)采用(yòng)膠原酶(méi)-中性蛋白(bái)酶(méi)混(hùn)合消(xiāo)化法結合密度(dù)梯(tī)度離心法，最後通(tōng)過內(nèi)皮(pí)細胞(bāo)專用(yòng)培養基(jī)培養篩(shāi)選製備而來(lái)
，細胞總(zǒng)量約為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室(shì)分離的人卵(luǎn)巢(cháo)微血管內皮細(xì)胞(bāo)經CD31免疫(yì)熒(yíng)光(guāng)鑒定(dìng)
，純度可達(dá)90%以上
，且(qiě)不(bù)含(hán)有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原體(tǐ)，細菌，酵母和真(zhēn)菌(jūn)等(děng)。