兔腸微(wēi)血(xiě)管內(nèi)皮細胞

兔腸微(wēi)血(xiě)管內皮(pí)細(xì)胞分離自腸(cháng)道組織；腸道(dào)指的是(shì)從(cóng)胃幽門至肛門的(dí)消化管(guǎn)。腸是(shì)消化(huà)管中(zhōng)最長的一(yī)段，也(yě)是(shì)功(gōng)能(néng)最(zuì)重要的一段(duàn)。哺(bǔ)乳(rǔ)動(dòng)物的腸(cháng)包括小腸(cháng)
，大(dà)腸(cháng)和直(zhí)腸(cháng)3大(dà)段。大量(liáng)的消化(huà)作(zuò)用(yòng)和幾(jī)乎(hū)全部消(xiāo)化產物(wù)的吸收都(dū)是在小腸內(nèi)進行的，大(dà)腸主要濃縮食(shí)物(wù)殘渣，形成(chéng)糞(fèn)便(biàn)，再通過(guò)直(zhí)腸(cháng)經肛門排出體外(wài)。腸(cháng)道堪稱(chēng)身體(tǐ)最(zuì)勞累的器(qì)官——每(měi)天不(bù)停地(dì)消(xiāo)化(huà)
，吸收食(shí)物(wù)，以(yǐ)提供足(zú)夠的(dí)養(yǎng)分，其實它的功能還(huán)遠不(bù)止此(cǐ)——它還(huán)是(shì)機體(tǐ)內(nèi)最(zuì)大(dà)的微(wēi)生態(tài)係統。微血(xiě)管是極細微的(dí)血管，管徑平(píng)均(jūn)為6-9 μm，連於動
，靜(jìng)脈(mài)之間(jiān)，互(hù)相連接(jiē)成網狀(zhuàng)。微血管壁薄，管徑較(jiào)小(xiǎo)，血流(liú)很(hěn)慢，通(tōng)透性大。其功能(néng)是(shì)利於血液(yè)與組織(zhī)之間(jiān)進(jìn)行物質(zhì)交(jiāo)換(huàn)。其管(guǎn)壁(bì)主要(yào)由(yóu)一(yī)層(céng)內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，在(zài)內皮外(wài)麵有一薄層(céng)結締組織。另(lìng)外還(huán)常可見(jiàn)到(dào)一種扁(biǎn)而有突起的(dí)細(xì)胞貼在(zài)微血(xiě)管的管壁外(wài)麵，稱為周(zhōu)細胞(bāo)。

自(zì)備(bèi)試劑： 0.25%胰蛋白(bái)酶(méi)  
，多聚-L-賴(lài)氨(ān)酸溶液（1×）或(huò)多(duō)聚-L-賴氨酸溶液（10×）或明(míng)膠(jiāo)包(bāo)被液(yè)（1 mg/mL）  
，PBS  
，完全培(péi)養(yǎng)基(jī)

包(bāo)被(bèi)條(tiáo)件： PLL（0.1 mg/mL）或明(míng)膠（0.1%）

培養基(jī)： 兔腸(cháng)微血管(guǎn)內皮細(xì)胞完(wán)全(quán)培養基(含FBS
，生(shēng)長添加劑(jì)
，Penicillin
，Streptomycin等)

換(huàn)液頻率： 每(měi)2-3天(tiān)換液(yè)一(yī)次

生(shēng)長(cháng)特性： 貼(tiē)壁

細胞(bāo)形態(tài)： 內皮(pí)細胞樣(yàng)

傳(chuán)代(dài)比例： 1:2

傳代特(tè)性： 可傳2-3代

消(xiāo)化液： 0.25%胰蛋白酶

兔腸(cháng)微(wēi)血(xiě)管內(nèi)皮細胞體外培養周期有限(xiàn)；建議使用配(pèi)套的(dí)專用生(shēng)長培養基(jī)及正確的操(cāo)作(zuò)方法(fǎ)來培養(yǎng)，以(yǐ)此保證(zhèng)該細胞的(dí)最佳(jiā)培(péi)養(yǎng)狀(zhuàng)態(tài)。

方法(fǎ)簡(jiǎn)介 實(shí)驗室(shì)分離的兔腸微血(xiě)管(guǎn)內皮細胞(bāo)采用(yòng)胰蛋(dàn)白酶-膠原(yuán)酶(méi)聯合消化(huà)法結(jié)合(hé)差速(sù)貼壁法(fǎ)
，並通過內(nèi)皮細胞專用(yòng)培(péi)養(yǎng)基培養篩選製備(bèi)而來(lái)，細胞總量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶。

質量檢測(cè) 實驗(yàn)室分離的兔(tù)腸微血(xiě)管(guǎn)內(nèi)皮(pí)細胞(bāo)經(jīng)CD31免疫熒光(guāng)鑒(jiàn)定，純度可(kě)達90%以上，且(qiě)不(bù)含有HIV-1
，HBV
，HCV
，支原體
，細菌(jūn)
，酵(jiào)母和真(zhēn)菌(jūn)等。