兔(tù)腹腔主(zhǔ)動脈外膜成纖(xiān)維細(xì)胞(bāo)

兔腹腔(qiāng)主(zhǔ)動脈外(wài)膜(mó)成纖(xiān)維細(xì)胞分離自兔腹(fù)腔(qiāng)主(zhǔ)動脈血管(guǎn)壁外(wài)膜(mó)組織
，是構成腹腔(qiāng)主(zhǔ)動(dòng)脈外膜的(dí)主要(yào)功(gōng)能(néng)細(xì)胞(bāo)。核(hé)心(xīn)功(gōng)能為(wéi)合(hé)成(chéng)和分泌膠(jiāo)原(yuán)蛋(dàn)白，彈性(xìng)纖(xiān)維等細(xì)胞外(wài)基(jī)質
，構(gòu)建(jiàn)腹腔(qiāng)主動(dòng)脈(mài)外(wài)膜的(dí)結(jié)構(gòu)支架(jià)
，維持(chí)血(xiě)管壁的(dí)完整(zhěng)性和(hé)彈性；分泌多種(zhǒng)細胞因(yīn)子和(hé)生長(cháng)因子(zǐ)
，參與血管(guǎn)的修(xiū)復，重塑過程(chéng)
，調控血管(guǎn)壁的穩態；同(tóng)時作為血(xiě)管壁的屏(píng)障
，抵御外界刺(cì)激對血(xiě)管(guǎn)的(dí)損(sǔn)傷。功能異(yì)常(cháng)與動(dòng)脈(mài)粥(zhōu)樣(yàng)硬(yìng)化(huà)，主動脈瘤(liú)，血管纖(xiān)維化等心血管疾病密切相關。原代(dài)培養2-3天後開(kāi)始(shǐ)貼(tiē)壁
，初始(shǐ)形態(tài)呈(chéng)短梭(suō)形或不規則(zé)形(xíng)；傳(chuán)代(dài)後細胞(bāo)生長旺盛
，可穩定(dìng)維(wéi)持成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)的典(diǎn)型形(xíng)態及功(gōng)能。是研(yán)究(jiū)腹腔主動(dòng)脈生(shēng)理(lǐ)功(gōng)能(néng)，心血管(guǎn)疾病發病(bìng)機(jī)製(zhì)及(jí)血(xiě)管修(xiū)復(fù)材料篩(shāi)選的(dí)重要(yào)實驗材料(liào)。

自(zì)備(bèi)試劑(jì)：0.25%胰蛋(dàn)白(bái)酶(méi)，膠原酶(méi)Ⅰ型(xíng)，PBS緩衝液(yè)，完全(quán)培養基(jī)

培(péi)養基(jī)：兔腹腔主(zhǔ)動脈外膜(mó)成(chéng)纖(xiān)維(wéi)細胞(bāo)完(wán)全(quán)培(péi)養基(jī)（含(hán)FBS，成纖維細胞生長因(yīn)子(zǐ)，維(wéi)生素C，Penicillin，Streptomycin等(děng)）

換液頻率(shuài)：每(měi)2-3天換(huàn)液一次

生長(cháng)特性：貼(tiē)壁(bì)生長(cháng)

細胞形態：短梭(suō)形，長(cháng)梭(suō)形(xíng)

傳(chuán)代比例：1:2-1:3

傳代特性(xìng)：可(kě)傳(chuán)6-8代；3-5代(dài)以(yǐ)內(nèi)細胞(bāo)狀態最(zuì)佳
，功能最穩定

消化液：0.25%胰蛋(dàn)白酶(méi)

兔(tù)腹(fù)腔(qiāng)主(zhǔ)動脈(mài)外膜(mó)成纖維(wéi)細胞(bāo)體外(wài)培(péi)養(yǎng)周期有(yǒu)限(xiàn)；建議(yì)使(shǐ)用配(pèi)套的專(zhuān)用(yòng)生長培養基及正(zhèng)確(què)的(dí)操(cāo)作方法來培(péi)養
，以(yǐ)此保證該細(xì)胞(bāo)的最(zuì)佳培(péi)養(yǎng)狀態。

方(fāng)法(fǎ)簡介(jiè)：實(shí)驗(yàn)室(shì)采用胰蛋(dàn)白酶(méi)-膠(jiāo)原酶聯合(hé)消(xiāo)化法結合差(chà)速(sù)貼壁(bì)法(fǎ)製備(bèi)該細胞(bāo)
，通(tōng)過特(tè)定消化(huà)體(tǐ)係溫和(hé)分解兔腹(fù)腔主動脈(mài)血管(guǎn)壁(bì)外膜(mó)組織
，分離獲(huò)得(dé)單個核細胞後(hòu)
，利(lì)用成纖(xiān)維(wéi)細(xì)胞(bāo)與其(qí)他細胞貼(tiē)壁速(sù)度(dù)的(dí)差異進行純化(huà)
，最終(zhōng)獲(huò)得高純度(dù)的(dí)兔腹腔(qiāng)主動(dòng)脈外(wài)膜(mó)成纖(xiān)維(wéi)細胞
，細胞總量約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶。

質(zhì)量(liáng)檢測：經成(chéng)纖(xiān)維細胞(bāo)特(tè)異(yì)性標誌(zhì)物(wù)（波形蛋(dàn)白(bái)Vimentin，FSP1，α-SMA）免疫(yì)熒光鑒定(dìng)
，本(běn)細胞純度(dù)可達90%以上；經細(xì)胞外基質分泌(mì)檢測(cè)驗證細(xì)胞功能正(zhèng)常(cháng)；經(jīng)檢(jiǎn)測(cè)不(bù)含(hán)有支原體，細菌(jūn)，酵母和(hé)真菌等外源汙染物(wù)
，細(xì)胞活(huó)性達(dá)標。