兔角質形成細(xì)胞(bāo)

兔(tù)角(jiǎo)質(zhì)形(xíng)成細胞(bāo)分離(lí)自(zì)兔皮膚(fū)表皮組織(zhī)，是構(gòu)成皮(pí)膚(fū)表皮(pí)的(dí)主要(yào)功(gōng)能細胞
。核心功能為通過(guò)增(zēng)殖，分化形成皮膚表皮的(dí)各(gè)層結構（基(jī)底層(céng)，棘層(céng)，顆粒層(céng)，角(jiǎo)質(zhì)層），構建(jiàn)皮(pí)膚的物理屏障，抵御(yù)外(wài)界機械性(xìng)損傷，病原體(tǐ)侵襲(xí)及水(shuǐ)分流失；分(fēn)泌多種細(xì)胞(bāo)因子(zǐ)和(hé)抗菌肽(tài)，參(cān)與皮膚(fū)的免(miǎn)疫防御和炎(yán)症(zhèng)調節；參與(yǔ)皮膚(fū)損傷後(hòu)的(dí)修(xiū)復(fù)過(guò)程，促進(jìn)創麵愈(yù)合
。功能(néng)異常與(yǔ)濕疹，銀屑病，魚鱗(lín)病(bìng)，皮(pí)膚(fū)腫(zhǒng)瘤(liú)等(děng)皮膚疾(jí)病(bìng)密(mì)切(qiē)相關
。原代(dài)培養3-4天(tiān)後開始貼壁(bì)，初始形態(tài)呈圓形或(huò)多邊形(xíng)；傳(chuán)代後(hòu)細(xì)胞(bāo)生長(cháng)旺盛，可(kě)穩定(dìng)維(wéi)持角質形成(chéng)細胞(bāo)的典型(xíng)增(zēng)殖分化功(gōng)能
。是研(yán)究皮(pí)膚(fū)生理功(gōng)能，皮(pí)膚疾病發病(bìng)機製及(jí)皮(pí)膚(fū)修(xiū)復材(cái)料(liào)篩選的(dí)重要實驗材料
。

自備試劑：0.25%胰(yí)蛋(dàn)白(bái)酶(méi)-EDTA消化液(yè)，PBS緩(huǎn)衝(chōng)液，完(wán)全培(péi)養(yǎng)基

培(péi)養(yǎng)基：兔(tù)甲狀(zhuàng)腺上(shàng)皮細胞完全培養基(jī)（含FBS，促甲狀(zhuàng)腺(xiàn)激素，表皮生長因(yīn)子(zǐ)，Penicillin，Streptomycin等）

換液(yè)頻(pín)率：每(měi)2-3天換(huàn)液一次(cì)

生長特(tè)性(xìng)：貼(tiē)壁生長，可形成濾(lǜ)泡樣(yàng)結(jié)構

細(xì)胞形(xíng)態：多邊形，立方形(xíng)

傳(chuán)代比例：1:2

傳代(dài)特性：可傳(chuán)4-6代；2-4代以(yǐ)內(nèi)細胞狀態最佳，功(gōng)能(néng)最(zuì)穩定

消化(huà)液：0.25%胰蛋白(bái)酶-EDTA消(xiāo)化(huà)液

兔角(jiǎo)質形成細胞(bāo)體外培養周期有限；建(jiàn)議使用配套(tào)的專(zhuān)用生長(cháng)培(péi)養(yǎng)基及正確的操作方(fāng)法來(lái)培(péi)養，以此保證(zhèng)該(gāi)細胞的最佳(jiā)培養(yǎng)狀(zhuàng)態(tài)
。

方法(fǎ)簡(jiǎn)介：實(shí)驗室采用(yòng)胰(yí)蛋白酶-EDTA聯(lián)合消化(huà)法結(jié)合(hé)差(chà)速貼壁(bì)法(fǎ)製(zhì)備該(gāi)細(xì)胞，通(tōng)過特定消化體(tǐ)係溫和分解(jiě)兔(tù)皮膚(fū)表皮組(zǔ)織(zhī)，分離獲(huò)得單(dān)個(gè)核細胞(bāo)後，利(lì)用(yòng)角質形(xíng)成細胞與其他(tā)細(xì)胞貼壁速(sù)度的(dí)差(chà)異(yì)進行純(chún)化，最(zuì)終獲(huò)得(dé)高純(chún)度的兔角質(zhì)形(xíng)成細(xì)胞，細胞(bāo)總(zǒng)量約(yuē)為(wéi)5×10⁵ cells/瓶
。

質(zhì)量檢(jiǎn)測：經角質形(xíng)成(chéng)細胞(bāo)特(tè)異(yì)性標(biāo)誌物(wù)（CK1，CK5，CK10，Involucrin）免疫(yì)熒光鑒定，本細(xì)胞(bāo)純度可(kě)達(dá)90%以上；經增殖分化(huà)功(gōng)能檢(jiǎn)測驗證細胞(bāo)功能(néng)正(zhèng)常；經檢(jiǎn)測(cè)不含有支原(yuán)體(tǐ)，細(xì)菌(jūn)，酵(jiào)母(mǔ)和真(zhēn)菌等外(wài)源汙(wū)染物，細胞(bāo)活性(xìng)達標(biāo)
。