兔外周(zhōu)血樹(shù)突狀細(xì)胞(bāo) (未成熟(shú)DC細(xì)胞(bāo))

兔外周血DC細(xì)胞分(fēn)離(lí)自(zì)外周血，由外(wài)周血單(dān)核細胞誘導(dǎo)而成(chéng)的；外周(zhōu)血是(shì)除骨髓之外(wài)的血液，臨(lín)床上(shàng)常(cháng)用一些(xiē)方(fāng)法把骨髓中的(dí)造血(xiě)幹(gān)細胞(bāo)釋(shì)放到(dào)血(xiě)液(yè)中(zhōng)，再在從血(xiě)液(yè)中提(tí)取(qǔ)分離得(dé)到(dào)造(zào)血(xiě)幹細胞，我們(mén)把這樣得到的幹細(xì)胞稱(chēng)為外(wài)周(zhōu)血幹細(xì)胞，在二(èr)十(shí)一世(shì)紀初(chū)人(rén)類開(kāi)始的生命方(fāng)舟計劃(huá)中首(shǒu)次提出(chū)外(wài)周(zhōu)血這一新(xīn)概(gài)念(niàn)。樹突狀細胞分為成(chéng)熟(shú)樹突狀細胞(bāo)和(hé)未(wèi)成熟(shú)樹突狀(zhuàng)細胞，典(diǎn)型的未成(chéng)熟樹(shù)突(tū)狀細胞呈半貼壁(bì)生(shēng)長，在GM-CSF，IL4的作(zuò)用下(xià)形成葡(pú)萄串樣(yàng)集落(là)，細(xì)胞大(dà)而形(xíng)態不規則，表(biǎo)麵(miàn)皺(zhòu)褶多，亦可(kě)見少量(liáng)短刺(cì)狀突，胞內細(xì)胞器豐(fēng)富並可(kě)見(jiàn)吞(tūn)噬泡，具有(yǒu)較(jiào)強的遷移能(néng)力，伴隨有(yǒu)部(bù)分(fēn)未完(wán)全誘導(dǎo)成的(dí)單(dān)核細胞(bāo)，貼壁(bì)形(xíng)態多樣(yàng)。而(ér)成(chéng)熟的(dí)樹(shù)突(tū)狀細胞由未成(chéng)熟DC進一(yī)步(bù)經(jīng)TNFα，LPS等誘導而(ér)成，多數呈懸浮生(shēng)長(cháng)， 細胞呈圓形，細胞(bāo)體積進一(yī)步(bù)增(zēng)大(dà)，表(biǎo)麵大量粗(cū)細(xì)不等(děng)的(dí)樹(shù)枝樣(yàng)突起（高倍鏡(jìng)或(huò)者(zhě)電鏡下可觀(guān)察到(dào)），伴隨少量(liáng)貼壁(bì)未(wèi)成熟細(xì)胞或(huò)者單核細(xì)胞(bāo)。未成熟(shú)DC細胞長(cháng)時(shí)間培養也(yě)可能導(dǎo)致(zhì)自(zì)發分化成(chéng)熟(shú)。DC細胞(bāo)尚(shàng)無特(tè)異性(xìng)細胞(bāo)表麵(miàn)分(fēn)子標誌(zhì)，主要通過形態學，組合性(xìng)細(xì)胞(bāo)表(biǎo)麵標誌，在混合(hé)淋(lín)巴細胞(bāo)反(fǎn)應中(zhōng)能激活(huó)初(chū)始T細胞(bāo)等特征(zhēng)進行鑒定(dìng)。其(qí)中成(chéng)熟樹突(tū)狀細胞(bāo)表麵高(gāo)表達主要組織相容性復合(hé)物（MHC）以(yǐ)及CD80，CD86等共(gòng)刺激分(fēn)子(zǐ)，進而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處於(yú)啟(qǐ)動，調控(kòng)，並維持免疫(yì)應答(dá)的中(zhōng)心(xīn)環節；未(wèi)成熟樹突狀(zhuàng)細(xì)胞具(jù)有(yǒu)很強的(dí)抗(kàng)原攝取加(jiā)工能力，但由(yóu)於缺乏多(duō)種共刺(cì)激分(fēn)子(zǐ)不能使初(chū)始T細(xì)胞(bāo)活化，增殖產生免(miǎn)疫(yì)應答，不能(néng)激(jī)活(huó)T細(xì)胞的(dí)第(dì)二(èr)信號(hào)，可(kě)導致(zhì)T細胞(bāo)無能，從而誘導(dǎo)免疫低(dī)反(fǎn)應或抗(kàng)原(yuán)免疫特異性(xìng)耐受。樹突狀細胞（DC細(xì)胞），imDC/mDC共(gòng)同(tóng)基礎鑒(jiàn)定(dìng)指(zhǐ)標為(wéi)CD11c，陽(yáng)性(xìng)率>80%，其中(zhōng)未(wèi)成熟樹突狀細(xì)胞(bāo)（imDC細(xì)胞）表麵CD80，CD86，MHC-Ⅱ類(lèi)分子等(děng)共(gòng)刺(cì)激(jī)分子(zǐ)表(biǎo)達較低，陽性(xìng)率(shuài)<30%以(yǐ)下(xià)。成熟(shú)樹突(tū)狀細胞(bāo)（mDC細胞）表麵(miàn)CD80，CD86，MHC-Ⅱ類(lèi)分(fēn)子等(děng)共(gòng)刺激分(fēn)子(zǐ)表達較高，陽(yáng)性率(shuài)>80%。依據(jù)成熟度會有(yǒu)波動變(biàn)化(huà)。

產品(pǐn)名稱	兔(tù)外周(zhōu)血(xiě)樹突狀細胞 (未成熟DC細胞(bāo))	英文(wén)名稱(chēng)	Rabbit Peripheral Blood Dendritic Cells (Immature DCs)
組(zǔ)織(zhī)來源	外周血(xiě)	產品規格	5×10^5Cells/T25
種(zhǒng)屬	兔(tù)	生長(cháng)特性(xìng)	半(bàn)貼壁
細(xì)胞(bāo)形態	圓形	貨號(hào)	YS-01X8446

自備試(shì)劑(jì)： 0.25%胰(yí)蛋白酶  ，PBS  ，完(wán)全培(péi)養(yǎng)基(jī)

培養基(jī)： 兔外(wài)周(zhōu)血(xiě)樹(shù)突(tū)狀細(xì)胞(未成(chéng)熟(shú)DC細胞)完全(quán)培(péi)養(yǎng)基(基礎培(péi)養基(jī)，含(hán)FBS，GM-CSF，IL-4，TNF-α，Glutamine，Penicillin，Streptomycin等)

換液頻率(shuài)： 每2-3天換液一次(cì)

生長(cháng)特(tè)性： 半(bàn)貼壁半懸浮(fú)

細胞形(xíng)態： 圓形，梭形，多(duō)角形，形態多(duō)樣(yàng)

傳代比例： 不傳代

傳代特性(xìng)： 屬於(yú)高度分(fēn)化(huà)細胞；屬於不(bù)增殖(zhí)細胞(bāo)群

消(xiāo)化(huà)液： 0.25%胰蛋白酶

兔(tù)外(wài)周(zhōu)血(xiě)樹突狀細胞 (未成(chéng)熟DC細胞)體外培(péi)養周(zhōu)期有限(xiàn)；建議使用(yòng)配套(tào)的專用生長(cháng)培(péi)養基(jī)及(jí)正(zhèng)確(què)的(dí)操(cāo)作(zuò)方法來(lái)培養，以此(cǐ)保證該細胞的最佳(jiā)培養(yǎng)狀(zhuàng)態。

方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分(fēn)離的(dí)兔外周(zhōu)血未(wèi)成(chéng)熟(shú)DC細胞采(cǎi)用(yòng)密度梯(tī)度離心法分(fēn)離(lí)外周血單個(gè)核細(xì)胞，培養過(guò)程添(tiān)加(jiā)細胞(bāo)因子誘導(dǎo)而來(lái)，細(xì)胞總量(liáng)約為5×10⁵ cells/瓶(píng)。

質量檢測 實驗(yàn)室分離的兔(tù)外周(zhōu)血(xiě)樹突狀(zhuàng)細胞（未成(chéng)熟DC細(xì)胞(bāo)）經CD11c免疫(yì)熒光鑒(jiàn)定，細胞形(xíng)態等綜(zōng)合鑒定，純度(dù)可(kě)達80%以(yǐ)上，且(qiě)不(bù)含有(yǒu)HIV-1，HBV，HCV，支原(yuán)體，細菌，酵母(mǔ)和真(zhēn)菌等。