中(zhōng)文(wén)名(míng)稱：人磷酸化細胞外信號(hào)調節(jié)激(jī)酶(pERK)ELISA試劑(jì)盒
編號  ：  Y-E983   
英(yīng)文簡(jiǎn)稱(chēng)：pERK  Elisa Kit
規(guī)格(gé)：48T／96T

A，液體類(lèi)標本(běn)

B，組織(zhī)匀漿

 液體類(lèi)標本:  包(bāo)括(kuò)血清(qīng)，血(xiě)漿，尿(niào)液，胸(xiōng)腹水，腦(nǎo)脊(jǐ)液，細(xì)胞培養(yǎng)上(shàng)清等

組(zǔ)織(zhī)匀漿標(biāo)本(běn)： 包括(kuò)動(dòng)植組(zǔ)織收集上清

       1.高效(xiào)，靈(líng)敏，特異的抗體；

　　2.穩(wěn)定的重復性和(hé)可靠(kào)性(xìng)；

　　3.吸(xī)附性(xìng)能好，空(kōng)白(bái)值低(dī)，孔(kǒng)底(dǐ)透(tòu)明度高的(dí)固(gù)相載(zǎi)體；

 樣(yàng)本(běn)實驗(yàn)準備

1. 血(xiě)清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘後，離心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔細(xì)收集上(shàng)清(qīng)。保(bǎo)存過程中(zhōng)如有沉(chén)澱形成，應(yīng)再次(cì)離心。

2. 血漿：

應(yīng)根(gēn)據(jù)標本的(dí)要求(qiú)選擇EDTA，檸(níng)檬酸(suān)鈉或肝(gān)素(sù)作為抗(kàng)凝(níng)劑，混合(hé)10-20分鐘後(hòu)，離心(xīn)20分鐘(zhōng)左右(2000-3000轉/分)。仔(zī)細(xì)收(shōu)集(jí)上清。保(bǎo)存過程中如有(yǒu)沉澱形成(chéng)，應(yīng)再次離(lí)心(xīn)。

3. 尿液(yè)：

用無菌(jūn)管收集。離心20分(fēn)鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集(jí)上清。保存(cún)過程中(zhōng)如有沉澱形(xíng)成，應再次離(lí)心。胸腹水，腦脊液(yè)參(cān)照此實(shí)行。

4. 細胞(bāo)培(péi)養(yǎng)上(shàng)清(qīng)：

檢(jiǎn)測(cè)分泌(mì)性(xìng)的成(chéng)份(fèn)時，用無菌(jūn)管收(shōu)集(jí)。離(lí)心(xīn)20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(2000-3000轉/分)。仔(zī)細收集上清(qīng)。

5. 培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)

   檢測細(xì)胞內的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shì)細(xì)胞(bāo)懸(xuán)液，細(xì)胞濃度(dù)達(dá)到100萬/ml左(zuǒ)右。通(tōng)過(guò)反復凍(dòng)融(róng)或(huò)加入組織蛋白萃(cuì)取試劑(jì)，以(yǐ)使(shǐ)細胞(bāo)破壞(huài)並放(fàng)出細胞內成(chéng)份(fèn)。離心20分鐘(zhōng)左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔(zī)細收集(jí)上清。保存(cún)過程中如(rú)有(yǒu)沉澱形成，應再(zài)次離心。

6. 組織標本

   切(qiē)割(gē)標本後(hòu)，稱(chēng)取(qǔ)重(zhòng)量。加入一(yī)定量的(dí)PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存(cún)備(bèi)用(yòng)。標(biāo)本融化後(hòu)仍(réng)然(rán)保持2-8℃的溫度(dù)。加入一定量(liáng)的(dí)PBS(PH7.4)，或組織(zhī)蛋白(bái)萃取(qǔ)試(shì)劑, 用(yòng)手工或匀漿(jiāng)器將標(biāo)本匀漿化(huà)。離心(xīn)20分(fēn)鐘左(zuǒ)右(yòu)(2000-3000轉/分)。仔(zī)細收(shōu)集上清(qīng)。分裝(zhuāng)後(hòu)一份待檢測，其(qí)餘(yú)冷凍備用(yòng)。