技術(shù)文獻
技術文獻
鳥氨酸氨(ān)基(jī)甲(jiǎ)酰(xiān)轉(zhuǎn)移(yí)酶(OCT)檢(jiǎn)測試劑盒樣本實驗前(qián)準(zhǔn)備(bèi)
鳥氨(ān)酸氨基(jī)甲酰轉(zhuǎn)移(yí)酶(OCT)檢測試劑盒樣本實驗(yàn)前(qián)準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液(yè)體樣本:包括(kuò)血(xiě)清,血漿,尿液(yè),胸腹水,腦(nǎo)脊液,細胞培養上清等(děng)。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘後,離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集(jí)上(shàng)清。保(bǎo)存(cún)過(guò)程(chéng)中(zhōng)如有沉(chén)澱(diàn)形(xíng)成,應再次離(lí)心(xīn)。
(2)血(xiě)漿(jiāng):
應(yīng)根據標(biāo)本的(dí)要(yào)求(qiú)選(xuǎn)擇EDTA,檸(níng)檬酸鈉或肝(gān)素(sù)作(zuò)為(wéi)抗凝劑(jì),混(hùn)合10-20分(fēn)鐘(zhōng)後(hòu),離心20分(fēn)鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細(xì)收集(jí)上(shàng)清。保(bǎo)存過程中(zhōng)如(rú)有(yǒu)沉澱形成,應(yīng)再(zài)次離心(xīn)。
(3)尿液:
用無菌(jūn)管收集(jí)。離心(xīn)20分(fēn)鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集(jí)上清。保(bǎo)存過程(chéng)中如有(yǒu)沉澱形成,應再(zài)次離(lí)心。胸(xiōng)腹水(shuǐ),腦脊液參(cān)照(zhào)此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上(shàng)清(qīng):
檢(jiǎn)測(cè)分泌性(xìng)的成份時,用(yòng)無(wú)菌(jūn)管收(shōu)集。離心20分鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細收集上清(qīng)。
(5)培養細胞
檢測細(xì)胞(bāo)內(nèi)的(dí)成份(fèn)時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸(xuán)液,細胞(bāo)濃(nóng)度達到(dào)100萬(wàn)/ml左(zuǒ)右(yòu)。通過(guò)反復(fù)凍融(róng)或加入(rù)組(zǔ)織(zhī)蛋(dàn)白萃取試(shì)劑,以(yǐ)使(shǐ)細胞(bāo)破壞並放(fàng)出細胞內成(chéng)份(fèn)。離心(xīn)20分鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉/分)。仔細收集(jí)上(shàng)清(qīng)。保存過(guò)程中如有(yǒu)沉(chén)澱(diàn)形成(chéng),應再次離心(xīn)。
(6)組織標本(běn)
切割標(biāo)本後,稱取(qǔ)重量。加入一定(dìng)量的(dí)PBS,PH7.4。用液(yè)氮迅速冷(lěng)凍(dòng)保(bǎo)存備(bèi)用。標本融(róng)化後仍然(rán)保持2-8℃的溫(wēn)度(dù)。加(jiā)入(rù)一定量(liáng)的(dí)PBS(PH7.4),或組(zǔ)織(zhī)蛋白(bái)萃(cuì)取試劑, 用手(shǒu)工(gōng)或匀(yún)漿器(qì)將標本(běn)匀(yún)漿化(huà)。離心(xīn)20分(fēn)鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉/分)。仔(zī)細(xì)收(shōu)集上清。分(fēn)裝(zhuāng)後一份待檢測(cè),其餘冷(lěng)凍(dòng)備用(yòng)。
鳥氨(ān)酸氨基(jī)甲酰(xiān)轉移酶(méi)(OCT)檢測(cè)試劑(jì)盒包(bāo)含(hán)以下各組(zǔ)分:
(1)已(yǐ)包被(bèi)抗原或抗體的固(gù)相(xiāng)載(zǎi)體(免疫吸(xī)附(fù)劑);
(2)酶標記的抗(kàng)原或抗體(結(jié)合物(wù));
(3)酶的(dí)底(dǐ)物;
(4)陰性對照品(pǐn)和(hé)陽性對(duì)照品(pǐn)(定(dìng)性(xìng)測定(dìng)中),參考(kǎo)標準品和控製血清(qīng)(定(dìng)量(liáng)測定(dìng)中);
(5)結合物及(jí)標本(běn)的(dí)稀釋(shì)液;
(6)洗滌液(yè);
(7)酶反應(yīng)終(zhōng)止(zhǐ)液(yè)。
