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技(jì)術(shù)文獻(xiàn)

小鼠轉化生長因(yīn)子(zǐ)(TGFβ2)ELISA試(shì)劑盒(hé)液體類標(biāo)本(běn)收(shōu)集

文(wén)字(zì):[大][中][小] 2020-6-3    瀏(liú)覽次數:874    

小鼠(shǔ)轉化生(shēng)長(cháng)因子(TGFβ2)ELISA試劑盒(hé)液體(tǐ)類標本(běn)收(shōu)集:

包括血(xiě)清(qīng),血漿,尿(niào)液,胸腹水,腦脊(jǐ)液(yè),細胞(bāo)培養(yǎng)上清(qīng)等。

1)血(xiě)清(qīng):

室(shì)溫血液自然(rán)凝固10-20分鐘(zhōng)後,離(lí)心20分(fēn)鐘左(zuǒ)右(2000-3000轉/分)。仔細(xì)收(shōu)集上(shàng)清。保(bǎo)存(cún)過(guò)程(chéng)中如(rú)有(yǒu)沉(chén)澱(diàn)形(xíng)成,應再次(cì)離(lí)心(xīn)。

2)血漿:

應根(gēn)據(jù)標本的(dí)要求選(xuǎn)擇(zé)EDTA,檸檬酸(suān)鈉(nà)或(huò)肝素作(zuò)為(wéi)抗(kàng)凝(níng)劑(jì),混合(hé)10-20分(fēn)鐘後,離(lí)心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔(zī)細收集上(shàng)清(qīng)。保(bǎo)存過(guò)程中(zhōng)如有沉澱形(xíng)成(chéng),應再次離心。

3)尿液:

用(yòng)無菌管(guǎn)收(shōu)集(jí)。離心20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(2000-3000轉/分)。仔細收(shōu)集上清。保(bǎo)存(cún)過(guò)程(chéng)中(zhōng)如有沉(chén)澱形成,應(yīng)再次離(lí)心。胸腹水(shuǐ),腦(nǎo)脊(jǐ)液參(cān)照(zhào)此(cǐ)實行(háng)。

4)細(xì)胞培養上(shàng)清(qīng):

檢測(cè)分泌性(xìng)的(dí)成份時,用無(wú)菌(jūn)管收集。離心20分鐘(zhōng)左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分(fēn))。仔(zī)細收集(jí)上清(qīng)。檢(jiǎn)測細胞(bāo)內(nèi)的成份時,用(yòng)PBS(PH7.2-7.4)稀(xī)釋細胞(bāo)懸液,細胞(bāo)濃(nóng)度達到(dào)100萬/ml左(zuǒ)右。通過反復(fù)凍融,以(yǐ)使(shǐ)細胞破(pò)壞(huài)並(bìng) 放(fàng)出細(xì)胞內成(chéng)份(fèn)。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn))。仔細收(shōu)集上清(qīng)。保存過程中如(rú)有沉(chén)澱(diàn)形成(chéng),應再(zài)次離(lí)心。

5)組織(zhī)標(biāo)本(běn):

切割(gē)標本(běn)後,稱(chēng)取重量(liáng)。加入一定量(liáng)的PBS,PH7.4。用液氮迅(xùn)速冷(lěng)凍(dòng)保存(cún)備(bèi)用。標本融(róng)化後仍(réng)然保持2-8℃的溫度。加(jiā)入一(yī)定量的PBS(PH7.4),用(yòng)手工或匀(yún)漿器將(jiāng)標(biāo)本匀(yún)漿充(chōng)分(fēn)。離(lí)心(xīn)20分(fēn)鐘左右(yòu)(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔(zī)細收集上(shàng)清。分裝後(hòu)一份待(dài)檢(jiǎn)測,其(qí)餘冷(lěng)凍備(bèi)用(yòng)。

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