蛋白(bái)激酶B（Akt1/PKBa）磷(lín)酸化(huà)（pS473）免疫(yì)組化試劑盒樣(yàng)本(běn)處理及(jí)要求(qiú)：

1. 血清：室(shì)溫血(xiě)液自(zì)然凝固(gù)10-20分鐘，離心(xīn)20分鐘(zhōng)左右（2000-3000轉/分）
。仔細收(shōu)集(jí)上清(qīng)，保(bǎo)存過程(chéng)中如出現沉(chén)澱(diàn)，應再(zài)次(cì)離(lí)心(xīn)
。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求(qiú)選擇EDTA或(huò)檸(níng)檬酸鈉作為抗凝劑，混(hùn)合10-20分鐘後，離(lí)心20分鐘(zhōng)左(zuǒ)右(yòu)（2000-3000轉/分(fēn)）
。仔細(xì)收(shōu)集(jí)上(shàng)清(qīng)，保(bǎo)存過(guò)程中如有沉(chén)澱形(xíng)成(chéng)，應(yīng)該(gāi)再次(cì)離心
。

3. 尿(niào)液：用(yòng)無菌(jūn)管(guǎn)收(shōu)集(jí)，離(lí)心(xīn)20分鐘(zhōng)左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分(fēn)）
。仔細(xì)收集(jí)上清(qīng)，保(bǎo)存(cún)過程中如有沉澱形成，應(yīng)再次離心(xīn)
。胸(xiōng)腹水(shuǐ)，腦脊液(yè)參照實行(háng)
。

4. 細(xì)胞培(péi)養(yǎng)上清(qīng)：檢測(cè)分泌(mì)性的(dí)成份時(shí)，用(yòng)無菌管(guǎn)收集
。離心(xīn)20分(fēn)鐘(zhōng)左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）
。仔細收集上清
。檢測(cè)細(xì)胞內的(dí)成份時，用(yòng)PBS（PH7.2-7.4）稀釋(shì)細胞懸液，細胞濃度(dù)達(dá)到(dào)

100萬/ml左(zuǒ)右(yòu)
。通過反(fǎn)復(fù)凍融(róng)，以使(shǐ)細胞(bāo)破(pò)壞並(bìng)放(fàng)出細(xì)胞(bāo)內成份
。離心20分鐘(zhōng)左右（2000-3000轉/分）
。仔細(xì)收(shōu)集(jí)上清
。保(bǎo)存(cún)過(guò)程(chéng)中(zhōng)如(rú)有(yǒu)沉澱(diàn)形(xíng)成(chéng)，應再次離心(xīn)
。

5. 組織(zhī)標本：切割標本後，稱(chēng)取重(zhòng)量
。加(jiā)入(rù)一定量(liáng)的(dí)PBS，PH7.4
。用(yòng)液(yè)氮(dàn)迅(xùn)速冷(lěng)凍保(bǎo)存備(bèi)用(yòng)
。標本融(róng)化後(hòu)仍(réng)然保(bǎo)持(chí)2-8℃的溫度(dù)
。加入(rù)一(yī)定量的(dí)PBS（PH7.4），用(yòng)手工或匀漿(jiāng)器將(jiāng)標(biāo)本匀(yún)漿充分(fēn)
。離心20分鐘(zhōng)左右(yòu)（2000-3000轉(zhuǎn)/分）
。仔細(xì)收集(jí)上清
。分裝(zhuāng)後一(yī)份待(dài)檢測，其餘冷(lěng)凍(dòng)備用(yòng)
。

6. 標本(běn)采(cǎi)集(jí)後盡早進行提取，提(tí)取按相關文獻(xiàn)進行，提取後應盡快(kuài)進(jìn)行(háng)實驗
。若(ruò)不(bù)能(néng)馬(mǎ)上(shàng)進(jìn)行試驗(yàn)，可將標本(běn)放於(yú)-20℃保(bǎo)存(cún)，但(dàn)應避(bì)免反復(fù)凍融.

7. 不能檢(jiǎn)測(cè)含NaN3的樣(yàng)品，因NaN3抑製(zhì)辣根過(guò)氧(yǎng)化物酶的（HRP）活(huó)性(xìng)
。