植(zhí)物乙酰化轉移酶(méi)（AT）ELISA試劑盒(hé)操作步(bù)驟

1）使(shǐ)用前，將(jiāng)所(suǒ)有試劑(jì)充(chōng)分(fēn)混匀。不(bù)要(yào)使(shǐ)液(yè)體產(chǎn)生大量(liáng)的泡沫(mò)，以免加樣(yàng)時加入大量(liáng)的氣泡，產(chǎn)生加樣上(shàng)的誤差(chà)。

2）根據(jù)待測樣(yàng)品數量(liáng)加上(shàng)標(biāo)準品的數量決定所(suǒ)需(xū)的(dí)板條(tiáo)數。每(měi)個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和(hé)空(kōng)白孔建議做(zuò)復孔。每(měi)個樣(yàng)品根據自(zì)己的數量來定，能使用復孔(kǒng)的(dí)盡量做復孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋(shì)液1：1稀釋(shì)後加入50ul於反應(yīng)孔(kǒng)內(nèi)。

3）加(jiā)入稀(xī)釋(shì)好後(hòu)的標準(zhǔn)品50ul於反(fǎn)應(yīng)孔(kǒng)，加入待(dài)測(cè)樣品(pǐn)50ul於反(fǎn)應孔內。立(lì)即(jí)加入50ul的(dí)生(shēng)物素(sù)標記(jì)的抗體。蓋(gài)上膜(mó)板，輕輕振蕩混(hùn)匀，37℃溫育1小(xiǎo)時。

4）甩去孔(kǒng)內液體，每孔加滿(mǎn)洗滌(dí)液(yè)，振蕩(dàng)30秒，甩去(qù)洗滌液，用(yòng)吸(xī)水(shuǐ)紙(zhǐ)拍(pāi)幹。重復(fù)此(cǐ)操作3次。如(rú)果(guǒ)用洗(xǐ)板機(jī)洗滌，洗滌(dí)次數增(zēng)加一次。

5）每孔加入(rù)80ul的親和鏈(liàn)酶素(sù)-HRP，輕輕振蕩混匀，37℃溫(wēn)育(yù)30分(fēn)鐘。

6）甩(shuǎi)去孔(kǒng)內液體，每(měi)孔加滿(mǎn)洗滌液(yè)，振蕩(dàng)30秒，甩去洗(xǐ)滌液(yè)，用吸水紙(zhǐ)拍幹(gān)。重復此(cǐ)操(cāo)作3次。如果用洗板(bǎn)機洗(xǐ)滌，洗(xǐ)滌(dí)次數(shù)增(zēng)加(jiā)一(yī)次。

7）每孔加入(rù)底(dǐ)物A，B各(gè)50ul，輕(qīng)輕(qīng)振蕩(dàng)混匀，37℃溫(wēn)育(yù)10分鐘(zhōng)。避免(miǎn)光照(zhào)。

8）取(qǔ)出酶(méi)標板(bǎn)，迅速(sù)加(jiā)入(rù)50ul終(zhōng)止液(yè)，加入終止(zhǐ)液(yè)後(hòu)應立即(jí)測定(dìng)結果(guǒ)。

9）在(zài)450nm波(bō)長處(chǔ)測定(dìng)各孔的(dí)OD值。