技術(shù)文(wén)獻
技術文(wén)獻
17-酮(tóng)皮質(zhì)類固(gù)醇(chún)檢(jiǎn)測試(shì)劑盒操作(zuò)步(bù)驟
1. 標(biāo)準品的稀(xī)釋(shì)與(yǔ)加(jiā)樣(yàng):在(zài)酶標(biāo)包被板(bǎn)上(shàng)設(shè)標準品孔(kǒng)10孔(kǒng),在(zài)di一,第二(èr)孔(kǒng)中(zhōng)分別加標準品(pǐn)100μl,然(rán)後在di一,第二孔(kǒng)中加(jiā)標準(zhǔn)品(pǐn)稀釋(shì)液(yè)50μl,混匀(yún);然後從di一孔,第二孔(kǒng)中(zhōng)各取100μl分(fēn)別加到(dào)第(dì)三(sān)孔(kǒng)和(hé)第(dì)四孔,再在第(dì)三(sān),第四(sì)孔分別(bié)加標準品稀釋液50μl,混匀(yún);然後在第(dì)三(sān)孔和第(dì)四孔(kǒng)中(zhōng)先(xiān)各(gè)取50μl棄掉(diào),再各(gè)取(qǔ)50μl分別(bié)加到(dào)第五,第(dì)六(liù)孔中(zhōng),再在第五,第六(liù)孔中分別(bié)加標(biāo)準(zhǔn)品稀(xī)釋(shì)液50ul,混(hùn)匀(yún);混(hùn)匀(yún)後(hòu)從第(dì)五,第(dì)六孔中(zhōng)各(gè)取50μl分別加(jiā)到第(dì)七,第(dì)八(bā)孔中,再(zài)在第(dì)七(qī),第(dì)八(bā)孔(kǒng)中(zhōng)分別加標準品(pǐn)稀釋(shì)液50μl,混匀後從第七(qī),第八(bā)孔中(zhōng)分別(bié)取50μl加(jiā)到(dào)第九(jiǔ),第(dì)十(shí)孔中,再在第九第(dì)十(shí)孔(kǒng)分別(bié)加標準(zhǔn)品稀(xī)釋液50μl,混匀後(hòu)從第九第十(shí)孔中各取(qǔ)50μl棄(qì)掉。(稀釋後各(gè)孔加樣(yàng)量(liáng)都(dū)為50μl,濃度分別為(wéi)180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加(jiā)樣(yàng):分別設空白孔(空白對照孔不加樣品(pǐn)及酶(méi)標試劑(jì),其餘各步操(cāo)作(zuò)相同(tóng)),待測樣(yàng)品孔。在(zài)酶(méi)標包被板上待(dài)測(cè)樣品孔中先(xiān)加(jiā)樣品稀釋(shì)液(yè)40μl,然(rán)後再加(jiā)待(dài)測樣品10μl(樣品(pǐn)最(zuì)終稀(xī)釋(shì)度為(wéi)5倍)。加樣(yàng)將樣(yàng)品加(jiā)於(yú)酶標(biāo)板孔底部,盡(jìn)量(liáng)不觸及孔(kǒng)壁,輕(qīng)輕晃動(dòng)混匀。
3. 溫育:用(yòng)封(fēng)板膜(mó)封(fēng)板(bǎn)後置37℃溫育(yù)30分鐘。
4. 配液:將(jiāng)30(48T的20倍(bèi))倍(bèi)濃(nóng)縮洗滌液用蒸(zhēng)餾水30(48T的20倍)倍稀(xī)釋後備用(yòng)。
5. 洗(xǐ)滌:小(xiǎo)心揭(jiē)掉封板膜,棄去(qù)液體(tǐ),甩幹(gān),每孔(kǒng)加(jiā)滿(mǎn)洗(xǐ)滌液,靜(jìng)置(zhì)30秒(miǎo)後(hòu)棄去,如此(cǐ)重復5次(cì),拍幹(gān)。
6. 加酶:每孔(kǒng)加(jiā)入酶標試(shì)劑50μl,空(kōng)白孔(kǒng)除外(wài)。
7. 溫(wēn)育(yù):操(cāo)作同3。
8. 洗(xǐ)滌(dí):操作同5。
9. 顯色(sè):每(měi)孔先加(jiā)入(rù)顯色劑A50μl,再(zài)加(jiā)入(rù)顯色(sè)劑(jì)B50μl,輕輕震蕩(dàng)混匀,37℃避(bì)光(guāng)顯色(sè)15分(fēn)鐘(zhōng).
10. 終止(zhǐ):每孔(kǒng)加終止液(yè)50μl,終(zhōng)止反應(yīng)(此時(shí)藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以(yǐ)空(kōng)白(bái)空調零(líng),450nm波長依序測量(liáng)各孔(kǒng)的吸光(guāng)度(OD值(zhí))。 測(cè)定(dìng)應在(zài)加終止(zhǐ)液後15分鐘(zhōng)。
人α-骨(gǔ)膠原交(jiāo)聯(α-CTx)酶(méi)聯免(miǎn)疫(yì)吸(xī)附測定試(shì)劑盒
人白細胞(bāo)分化(huà)抗原CD42 (CD42)酶聯免疫吸附(fù)測定試(shì)劑(jì)盒(hé)
人白細(xì)胞抗(kàng)原(yuán)B27(HLA-B27)酶聯免(miǎn)疫吸附(fù)測定試(shì)劑(jì)盒(hé)
人成(chéng)纖維細(xì)胞(bāo)生長因(yīn)子受體(tǐ)2(FGFR2)酶(méi)聯免(miǎn)疫(yì)吸附(fù)測(cè)定試(shì)劑盒
人腸脂肪酸(suān)結(jié)合(hé)蛋(dàn)白(IFABP)酶聯(lián)免疫吸附(fù)測定(dìng)試劑(jì)盒
人(rén)脂蛋白a(LP-a)酶聯免(miǎn)疫(yì)吸附(fù)測定試劑(jì)盒
人髓鞘鹼性蛋(dàn)白(MBP)酶(méi)聯免疫吸(xī)附測(cè)定試劑(jì)盒
人端(duān)粒酶(TE)酶(méi)聯(lián)免疫吸(xī)附(fù)測定(dìng)試(shì)劑盒
人組(zǔ)織因子途徑抑製(zhì)因(yīn)子(TFPI)酶聯(lián)免(miǎn)疫吸附測(cè)定(dìng)試劑(jì)盒
人血栓調節(jié)蛋白(TM)酶聯免疫吸附(fù)測(cè)定試劑盒
人補(bǔ)體因子(zǐ)4 (C4)酶聯免(miǎn)疫(yì)吸(xī)附測定(dìng)試劑盒
人鐵蛋白(FE)酶聯免(miǎn)疫(yì)吸附(fù)測定試(shì)劑(jì)盒(hé)
人免疫球蛋白G(IgG)酶(méi)聯免(miǎn)疫(yì)吸附測定試劑盒
人(rén)血清(qīng)轉(zhuǎn)鐵(tiě)蛋(dàn)白(bái)(TF)酶(méi)聯免(miǎn)疫吸附測定試劑(jì)盒(hé)
人(rén)卵泡(pào)抑(yì)素樣蛋白(bái)1(FSTL1)酶聯免疫吸(xī)附測(cè)定(dìng)試(shì)劑盒
人(rén)賴氨(ān)酰氧化(huà)酶(méi)(LOX)酶聯免疫(yì)吸(xī)附測定(dìng)試劑(jì)盒
人絨毛膜促(cù)性(xìng)腺激(jī)素(CG)酶(méi)聯免(miǎn)疫吸附(fù)測定試劑(jì)盒
人生長激(jī)素(sù)(GH)酶(méi)聯免(miǎn)疫(yì)吸(xī)附測定(dìng)試劑(jì)盒
人IV型膠原(COL4)酶聯(lián)免疫吸(xī)附測定(dìng)試劑(jì)盒(hé)
人纖維(wéi)連接(jiē)蛋(dàn)白(bái)(FN)酶聯(lián)免疫吸(xī)附測定試(shì)劑(jì)盒
人(rén)白介素(sù)9(IL-9)酶(méi)聯免(miǎn)疫(yì)吸附(fù)測(cè)定試劑(jì)盒
人(rén)I型(xíng)前(qián)膠(jiāo)原(yuán)(PCI)酶聯(lián)免(miǎn)疫吸(xī)附測定試(shì)劑盒(hé)
人(rén)III型(xíng)前(qián)膠(jiāo)原(PCIII)酶聯免疫(yì)吸附測(cè)定試劑(jì)盒(hé)
- 上一(yī)條:雞馬立克病毒(MDV)核酸試劑盒實(shí)驗(yàn)要(yào)點(diǎn)
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