檸檬(méng)酸合(hé)酶(CS）生化(huà)試劑盒（可(kě)見(jiàn)分(fēn)光(guāng)光(guāng)度法）操作(zuò)步驟:
實(shí)驗開始(shǐ)前
，各(gè)試劑(jì)均應(yīng)平(píng)衡至室(shì)溫（試劑(jì)不能直(zhí)接(jiē)在(zài)37℃溶解）；試劑或樣品(pǐn)稀釋時
，均需(xū)混匀(yún)
，混匀(yún)時盡(jìn)量避(bì)免起(qǐ)泡。實驗前應預(yù)測(cè)樣(yàng)品(pǐn)含(hán)量(liáng)
，如樣品濃度過高(gāo)時(shí)
，應對(duì)樣(yàng)品進行稀(xī)釋(shì)
，以(yǐ)使(shǐ)稀釋後的(dí)樣(yàng)品(pǐn)符合試(shì)劑(jì)盒的檢測(cè)範圍
，計(jì)算(suàn)時(shí)再(zài)乘以相應的稀釋倍數。
1.        加樣：分別設(shè)空白孔(kǒng)，標(biāo)準孔，待(dài)測樣品(pǐn)孔(kǒng)。空白孔加樣品(pǐn)稀釋液(yè)100μl
，餘孔(kǒng)分別(bié)加(jiā)標準品(pǐn)或(huò)待(dài)測樣(yàng)品(pǐn)100μl
，注意(yì)不(bù)要有氣泡(pào)
，加(jiā)樣將樣品加於(yú)酶標(biāo)板孔底(dǐ)部(bù)
，盡(jìn)量(liáng)不(bù)觸(chù)及孔(kǒng)壁
，輕輕(qīng)晃動(dòng)混(hùn)匀
，酶標(biāo)板(bǎn)加(jiā)上蓋或(huò)覆(fù)膜
，37℃反(fǎn)應120分鐘(zhōng)。為(wéi)保(bǎo)證(zhèng)實驗(yàn)結果有(yǒu)效(xiào)性
，每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶(róng)液。
2.        棄去液(yè)體
，甩幹(gān)
，不(bù)用洗(xǐ)滌。每孔加檢(jiǎn)測(cè)溶液A工作液 100μl（在(zài)使用前(qián)一(yī)小時內(nèi)配製(zhì)）
，酶標(biāo)板加上(shàng)覆(fù)膜, 37℃反(fǎn)應60分鐘。
3.        溫育60分鐘後
，棄(qì)去孔(kǒng)內液體
，甩幹(gān)
，洗(xǐ)板(bǎn)3次
，每次浸(jìn)泡(pào)1-2分鐘(zhōng)
，大約400μl/每(měi)孔
，甩(shuǎi)幹（也可輕拍將孔內液體(tǐ)拍(pāi)幹）。
4.        每(měi)孔(kǒng)加檢(jiǎn)測溶液(yè)B工作液(yè)（同檢(jiǎn)測(cè)A工作液） 100μl
，酶標(biāo)板(bǎn)加上覆(fù)膜37℃反應60分鐘(zhōng)。
5.        溫育60分(fēn)鐘後(hòu)
，棄去(qù)孔內液體
，甩幹
，洗板(bǎn)5次(cì)
，每次(cì)浸泡1-2分(fēn)鐘
，350μl/每(měi)孔(kǒng)
，甩幹(gān)（也可輕(qīng)拍(pāi)將孔內(nèi)液體(tǐ)拍幹(gān)）。
6.        依序每孔加底物(wù)溶液90μl
，酶標(biāo)板(bǎn)加(jiā)上覆膜(mó)37℃避光顯色（30分(fēn)鐘內
，此時(shí)肉(ròu)眼可見(jiàn)標準品的(dí)前(qián)3-4孔有明顯(xiǎn)的(dí)梯(tī)度蘭(lán)色
，後3-4孔梯(tī)度(dù)不(bù)明顯
，即可終止）。

7.       依序每(měi)孔加終止溶(róng)液(yè)50μl
，終止(zhǐ)反應
，此(cǐ)時藍色立轉(zhuǎn)黃(huáng)色(sè)。終止液(yè)的加(jiā)入(rù)順序應盡(jìn)量與底物液的加入(rù)順序相(xiāng)同(tóng)。為了保證實驗結果(guǒ)的準(zhǔn)確性(xìng)
，底(dǐ)物反應時間(jiān)到(dào)後應盡快(kuài)加入終(zhōng)止液。

 水(shuǐ)螺菌
 腸(cháng)炎沙門氏菌腸炎亞(yà)種
 熒(yíng)光假(jiǎ)單胞菌
 萎蔫短(duǎn)小(xiǎo)杆菌
 粘(nián)液(yè)玫瑰單(dān)胞菌
 海藻(zǎo)希(xī)瓦氏菌(jūn)
 嗜(shì)鹽(yán)細(xì)菌(jūn)屬(shǔ)
 新(xīn)鞘(qiào)氨(ān)醇(chún)單胞(bāo)菌
 蜃(shèn)樓(lóu)耶(yé)爾(ěr)森氏(shì)菌
 脫(tuō)氮假(jiǎ)單(dān)胞菌(jūn)
 脫氮(dàn)付球菌
 耐(nài)放(fàng)射(shè)異(yì)常球(qiú)菌(jūn)
 桃色(sè)歐文氏菌(jūn)
 丁香(xiāng)假(jiǎ)單胞菌
 白色噬瓊(qióng)膠菌(jūn)
 假(jiǎ)交替單胞菌
 鼠李糖(táng)乳杆菌
 雙(shuāng)歧(qí)雙歧杆菌
 粘質沙雷氏菌(jūn)
 噬(shì)糖(táng)鹽(yán)紅菌(jūn)
 師崗(gǎng)鏈黴菌(jūn)
 委內瑞(ruì)拉鏈(liàn)黴菌
 枯(kū)草芽(yá)孢杆菌
 彎曲芽孢杆菌
 缺(quē)陷(xiàn)短(duǎn)波單(dān)胞菌(jūn)
 副凝聚短狀杆菌(jūn)
 氧化微杆菌
 硝(xiāo)基還(huán)原假單胞菌
 肺(fèi)炎克雷(léi)伯氏(shì)菌(jūn)
 成團腸杆(gān)菌(jūn)(成團泛菌)