產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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氣(qì)單(dān)胞(bāo)菌通用(yòng)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Aeromonas spp.PCR |
YS-P013794 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結果(guǒ)應為陽性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次實驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於可疑樣本(běn)建議(yì)復核一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
氣(qì)單胞菌通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中模(mó)板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選擇特異性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區，其特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶細胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後，即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析，不一定要(yào)用同(tóng)位素，無放射(shè)性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求低
不需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總RNA均(jūn)可作為擴增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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