產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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鏈黴菌通(tōng)用PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Streptomyces spp.PCR |
YS-P014798 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應為陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
鏈黴菌(jūn)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較高(gāo)的溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區，其特異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要用同位(wèi)素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
